一管式病毒DNA-RNA提取試劑是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科學(xué)研究，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多一管式病毒DNA-RNA提取試劑等DNA提取純化產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括一管式病毒DNA-RNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：一管式病毒DNA-RNA提取試劑盒
英文名稱：One-tube virus RNA-DNA extraction kit
產(chǎn)品貨號：BTN80101
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒是整合一管式病毒DNA提取試劑盒和一管式病毒RNA提取試劑盒兩產(chǎn)品而得，專門用于從血清(血漿)等液體樣品中同時提取病毒DNA(如HBV DNA)和病毒RNA(如HCV RNA和HIV RNA)的產(chǎn)品。本產(chǎn)品靈敏度高，穩(wěn)定性好，使用簡單快捷，尤其適合于整合到臨床PCR或RT-PCR 檢測試劑盒中。

試劑盒特點：
1. 回收率高，可以達(dá)到90%以上，高于大部分基于離心柱的提取方法?？梢愿鶴IAGEN的同類產(chǎn)品媲美。
2. 靈敏度高，通過PCR 檢測到病毒DNA的zuì終靈敏度可以達(dá)到30 拷貝/mL樣品，通過RT-PCR 檢測到病毒RNA的zuì終靈敏度可以達(dá)到50 拷貝/mL樣品。
3.一管式操作，減少了樣品污染的可能。
4.一站式套裝，除樣品外客戶不需要準(zhǔn)備任何試劑，降低了實驗誤差。
5. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有機溶液。
6.處理量大，如果加上病毒離心富集步驟，zuì多可以處理1.5mL液體病毒樣品。
7.與PCR、熒光PCR、RT-PCR、熒光RT-PCR等后續(xù)反應(yīng)兼容。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	30ml
溶液B	40ml
溶液C	50ml
溶液D	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸，溶液A4℃保存，溶液B和溶液C室溫保存，有效期一年。溶液B和溶液C具有揮發(fā)性，使用后需要將瓶蓋擰緊。

使用方法：
1. 將0.1-0.2mL液體樣品轉(zhuǎn)移到1.5mL 旋蓋離心管中。如果需要富集樣品中的病毒，可以先將1.5mL液體樣品轉(zhuǎn)移到1.5mL 旋蓋離心管中,然后4℃ 24,000 g離心60分鐘，移棄1.3mL上清液后繼續(xù)操作下一步的操作。
2. 加入0.6mL溶液A，蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
 注意:溶液A用前需37℃-65℃水浴融化并充分搖勻后方可使用。
3.室溫靜置10分鐘。
4. 加入0.6mL溶液B，蓋上蓋子后振蕩3-5秒。
5. 15000g室溫離心15分鐘。強烈建議在離心管管壁上用記號筆做簡單標(biāo)記以區(qū)別離心面和向心面。
6.小心移棄上清。注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
7. 加入1.0mL溶液C，振蕩數(shù)秒后15000g室溫離心5分鐘。注意：將離心管放入離心機時一定要離心面向外。
8. 移棄上清，注意不要觸及管底的DNA和RNA沉淀。
9. 短暫離心數(shù)秒，注意：將離心管放入離心機時一定要離心面向外。
10.小心移棄殘留上清(殘留的溶液C會影響后續(xù)反應(yīng))。此時離心面的管壁上將有可見的膜狀沉淀。
11. 加入100-200μl溶液D，用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液混濁或有少量不溶物是正?，F(xiàn)象。不要離心只取上清使用，因為不溶沉淀物中含有DNA和RNA，必須取混合液使用(哪怕很渾濁)。
12. 直接取適量樣品用于PCR或RT-PCR，也可短期保存于-20℃或-80℃。

使用效果：
DNA病毒：

圖注：用本產(chǎn)品和市場上某同類產(chǎn)品分別提取0.2mL HBV 陽性血漿(含1000拷貝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl進(jìn)行熒光PCR(使用MJ Research的CHROMO4熒光PCR 儀)。紅和綠線表示本產(chǎn)品，藍(lán)線表示市場上某同類產(chǎn)品。
RNA病毒：

圖注：用本產(chǎn)品和市場上某同類產(chǎn)品分別提取0.2mL HBV 陽性血漿(含1000拷貝/mL HBV)，DNA 溶于200μl溶液D中，取5μl進(jìn)行熒光PCR(使用MJ Research的CHROMO4熒光PCR 儀)。紅和綠線表示本產(chǎn)品，藍(lán)線表示市場上某同類產(chǎn)品。
圖注：用本產(chǎn)品和市場上進(jìn)口Q公司同類產(chǎn)品分別提取0.2mL培養(yǎng)的B型流感病毒上清液(含1000 拷貝/mL 病毒)，RNA 溶于200μl溶液D中，取10μl進(jìn)行熒光PCR(50μl 體系，使用MJ Research的CHROMO4熒光PCR 儀)。紅線表示本產(chǎn)品，藍(lán)線表示進(jìn)口的Q公司同類產(chǎn)品。

疑難解答：
Q：樣品中如果同時有RNA和DNA，DNA 會對RNA的RT-PCR 克隆產(chǎn)生干擾嗎？
A：不會。病毒一般或者只含RNA，或者只含DNA，如果樣品中正好同時含有DNA 病毒和RNA 病毒，但由于兩者之間沒有同源性，所以DNA 也不會干擾RNA的RT-PCR擴增。這跟組織細(xì)胞中提出的核酸樣品不一樣，因為后者的DNA和RNA是同源的，即任何RNA分子都有與之同源的DNA分子，所以如果同時存在，DNA 也會在RT-PCR時跟引物結(jié)合，產(chǎn)生擴增。干擾RT-PCR。

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名稱：柱式水樣DNA提取試劑盒
貨號：BTN101112
規(guī)格：50次

名稱：柱式病毒DNA提取試劑盒
貨號：BTN70701
規(guī)格：50次
本試劑盒是在一管式病毒DNA提取試劑盒的基礎(chǔ)上開發(fā)的、專門用于從血清(血漿)等液體樣品及拭子(咽拭子、鼻拭子、口腔拭子、陰道拭子等)中提取微量病毒DNA的產(chǎn)品。

試劑盒特點：
1. 操作簡單，整個過程只需要20分鐘左右，不需要額外在洗柱液中補加乙醇。
2. 靈敏度高，通過PCR 檢測到的zuì終靈敏度可以達(dá)到30-50拷貝/mL。
3. 安全，不需要使用苯酚和氯fǎng等有機溶液。
4. 如果加上病毒離心富集步驟，zuì多可以處理1.5mL液體病毒樣品。
5.與PCR和熒光PCR 兼容。
6. 價廉物美，遠(yuǎn)高于國外同類產(chǎn)品。
7.適用于各種材料，包括血清、血漿、腦脊液、尿液、糞便、培養(yǎng)細(xì)胞上清液等無細(xì)胞材料。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	30ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液3.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 對于液體病毒樣品：在1.5mL離心管中加入0.1-0.2mL液體病毒樣品。如果病毒需要富集，可以將1.5mL液體在4℃ 24,000 g 冷凍離心60分鐘，移棄1.3mL后剩下的0.2mL 用于第2 步處理。對于拭子樣品：將一個拭子放入離心管中，加入1mL自備的生理鹽水，振蕩器上充分振蕩半分鐘，然后轉(zhuǎn)移0.2mL 到1.5mL塑料離心管中，用于第2 步處理。
2. 加入0.6mL溶液A到步得到的0.2mL樣品中，振蕩30秒混勻后室溫放置10分鐘。注意：溶液A在4℃放置后可能會產(chǎn)生沉淀，使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用。
3. 短暫離心后將500μl溶液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
4. 12000rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
5. 將剩余溶液短暫離心后全部轉(zhuǎn)移到步驟3的離心吸附柱中，室溫放置2分鐘。
6. 12000rpm室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
7. 加入0.7mL 通用洗柱液到離心吸附柱中，12000 rmp室溫離心1分鐘，棄收集管中的穿透液，把離心吸附柱放回到收集管中。
8. 12000rpm室溫離心1分鐘(干甩)，棄含穿透液的離心管。
9. 將干甩后的離心吸附柱套入到一個自備的RNase-free的1.5mL離心管中，在離心吸附柱的濾膜的中部加入30-100μl DNA 洗脫液3.0，然后室溫放置2分鐘。
10. 12000rpm室溫離心1分鐘，離心管中的溶液即為病毒DNA溶液。
11. DNA樣品可以直接用于PCR，也可放-20℃長期保存。

疑難解答：
Q：提取液體樣品/病毒核酸(RNA或DNA)為何很難？
A：原因一是量少。病毒顆粒中的RNA或DNA是作為遺傳物質(zhì)保存，每個病毒zuì多只攜帶幾個拷貝(而一個細(xì)胞中有上萬種RNA分子，每種RNA 有很多拷貝)，同時其長度也十分有限(一般不到細(xì)胞基因組的萬分之一)，樣品中病毒數(shù)往往又不是很多，使得樣品中病毒核酸的量往往比一個細(xì)胞中核酸的量還少，所以操作中十分容易丟失。另外，由于得到的核酸量很少，不能使用電泳和測OD檢測，只能通過PCR或RT-PCR 檢測，而PCR或RT-PCR的條件又需要優(yōu)化，所以要確定提取是否成功十分不容易。

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