WH0025 植物基因DNA組提取試劑盒(

植物基因DNA組提取試劑盒(是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品,由北京百奧萊博供應(yīng),本產(chǎn)品僅用于生物化學(xué)研究方面,我公司專注于DNA提取純化產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和供應(yīng),為您提供的植物基因DNA組提取試劑盒(質(zhì)量可靠,批間差小,且價(jià)格公道,熱切盼望您選購(gòu)我們的產(chǎn)品。...
特別提示:包括植物基因DNA組提取試劑盒(離心吸附柱法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:植物基因DNA組提取試劑盒(離心吸附柱法)
英文名稱:Plant genomic DNA rapid extraction kit
產(chǎn)品貨號(hào):WH0025
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次
本試劑盒采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng),提取多種植物組織中的基因組DNA。離心吸附柱中采用的硅基質(zhì)材料為本公司特有材料,、專一吸附DNA,可zuì大限度去除雜質(zhì)蛋白。提取的基因組DNA片段大,可達(dá)40 kb,純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠。
產(chǎn)品特點(diǎn):
·簡(jiǎn)單快速:1h內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA。
·害:無(wú)需使用酚/lǜ仿抽提,操作安全。
·純度高、質(zhì)量好:100mg植物組織中可提取到3-30μg基因組DNA,OD260/OD280的值在1.7-1.9范圍內(nèi)。
下游應(yīng)用:
· PCR、qPCR與多重PCR。
· RAPD、RFLP、AFLP、SSR等分子標(biāo)記。
·文庫(kù)構(gòu)建、Southern雜交。
不同植物組織DNA提取得率:(樣本量:100mg,OD260/OD280:1.7~1.9)
植物材料 | 平均DNA產(chǎn)量 |
擬南芥 | 3~4μg |
小麥 | 25~30μg |
松樹 | 25~30μg |
馬鈴薯 | 4~6μg |
番茄 | 10~15μg |
油菜 | 2~4μg |
煙草 | 20~25μg |
水稻 | 10~25μg |
大豆 | 20~30μg |
玉米 | 20~30μg |
不同來(lái)源的植物材料中基因組會(huì)有差異,以上所有材料均為新鮮幼嫩葉片。
提取實(shí)例:

本試劑盒提取的各種植物基因組DNA電泳結(jié)果。
起始量:100mg葉片,100μl洗脫,3μl上樣,瓊脂糖凝膠濃度為1%,6V/cm,電泳20min,marker為λDNA/Hind III
1:大豆新鮮幼嫩葉片;
2:煙草新鮮幼嫩葉片;
3:小麥新鮮幼嫩葉片;
4:玉米新鮮幼嫩葉片;
試劑盒組成:
組分 | 50T | 200T |
緩沖液LP1 | 25ml | 100ml |
緩沖液LP2 | 10ml | 40ml |
緩沖液LP3 | 21ml | 84ml |
漂洗液PW | 15ml | 50ml |
洗脫緩沖液TE | 15ml | 60ml |
RNase A(10mg/ml) | 300μl | 1.25ml |
吸附柱CB3 | 50個(gè) | 200個(gè) |
收集管(2ml) | 50個(gè) | 200個(gè) |
保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。
注意事項(xiàng):(請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
2.緩沖液LP1可能發(fā)黃,并不影響提取效果。
3.若緩沖液LP1或LP2有沉淀析出,可在37℃水浴溶解,搖勻后使用。
4.所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī),室溫下離心。
使用方法:
使用前請(qǐng)先在緩沖液LP3和漂洗液PW中加入無(wú)水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。
1.處理材料:
取植物新鮮組織100mg或干重組織20 mg,加入液氮充分碾磨。加入400μl緩沖液LP1和6 μl RNase A(10 mg/ml),旋渦振蕩1 min,室溫放置10min。
2.加入130 μl緩沖液LP2,充分混勻,旋渦振蕩1 min。
3.12000rpm(~13400×g )離心5 min,將上清移至新的離心管中。
4.加入1.5倍體積的緩沖液LP3(例如500 μl的上清液加750 μl緩沖液LP3)(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),立即充分振蕩混勻15 sec,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀。
5.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm(~13400×g )離心30 sec,倒掉廢液,吸附柱CB3放入收集管中。
6.向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW (使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12000rpm(~13400×g )離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
注意:如果吸附柱膜呈現(xiàn)綠色,向吸附柱CB3中加入500 μl無(wú)水乙醇,12000rpm(~13400×g )離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
7.重復(fù)操作步驟6.
8.將吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(~13400×g)離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
9.將吸附柱CB3轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200 μl洗脫緩沖液TE,室溫放置2-5 min,12000rpm(~13400×g )離心2 min,將溶液收集到離心管中。
注意:為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室溫放置2 min,12000rpm (~13400×g )離心2 min。洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50 μl,體積過(guò)小影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率;且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。
DNA濃度及純度檢測(cè):
1.得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過(guò)程中的剪切力等因素有關(guān)?;厥盏玫降腄NA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。
2.DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰,OD260值為1相當(dāng)于大約50 μg/ml雙鏈DNA、40 μg/ml單鏈DNA。
3.OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9,如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液,而使用ddH2O,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但并不表示純度低。
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名稱:非凍型尿液DNA保存液
貨號(hào):BTN90315
規(guī)格:100mL
本品在室溫條件下長(zhǎng)期保存用于DNA提取的尿液樣品保存液。它能夠、長(zhǎng)期保證DNA分子的完整性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 保存時(shí)間長(zhǎng),可室溫保存尿液DNA長(zhǎng)達(dá)六個(gè)月,尤其適合于野外尿液樣品采集。
2. DNA完整性好,純化后長(zhǎng)度在20-50 Kb之間。
3. DNA無(wú)化學(xué)修飾,提得的DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
4. 能防止尿液在4℃結(jié)晶。
5. 安全可靠,本產(chǎn)品無(wú)害。
6. 使用簡(jiǎn)單,直接把新鮮的尿液樣品與本產(chǎn)品混合即可。
儲(chǔ)存條件:室溫運(yùn)輸及保存,有效期兩年。
使用方法:(以DNA提取為例)
1. 迅速將尿液與本產(chǎn)品按10:1的比例混合。
2. 常溫閉光保存直到使用。
3. 使用常規(guī)液體DNA提取方法提取DNA即可。推薦使用柱式尿液DNA提取試劑盒(BTN90314),使用柱式尿液DNA提取試劑盒提取本產(chǎn)品保存的尿樣,兼容性好,提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。
名稱:柱式骨骼DNA提取試劑盒
貨號(hào):BTN91102
規(guī)格:50次
本試劑盒專門用于從動(dòng)物骨骼(包括骨粉)樣品中提取DNA的產(chǎn)品,20次規(guī)格足夠50次微量提取。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 微量提取,一次可以處理300mg左右的骨骼(但需要先將骨粉變成骨粉)。
2. 柱式操作,方法簡(jiǎn)單,整個(gè)過(guò)程只需要40-60分鐘。
3. 得到的DNA分子量不均勻,一般在20 Kb到100bp之間,具體取決于骨骼的新鮮程度,骨粉的加工方法等。
4. 得到的DNA可以直接用于PCR或熒光PCR反應(yīng)。
試劑盒組成:
成分 | 規(guī)格 |
溶液A | 50mL |
溶液B | 15mL |
溶液C | 30mL |
離心吸附柱 | 50套 |
通用洗柱液 | 50mL |
DNA洗脫液2.0 | 10mL |
說(shuō)明書 | 1份 |
儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。
使用方法:
1. 骨粉的制備:用自備酒精將骨骼表面擦洗干凈,以防污染物對(duì)后續(xù)PCR的影響,然后用骨鉆在處理干凈的骨骼區(qū)域鉆取骨粉。對(duì)于已經(jīng)制備好的、商品化的骨粉,可以跳過(guò)此步,直接進(jìn)入下一步。
2. 用天平稱取0.2克骨粉,轉(zhuǎn)移到2mL塑料離心管中。
3. 加入1mL溶液A到骨粉中,充分振蕩30秒混勻。(注意:溶液A在4℃放置后可能會(huì)產(chǎn)生沉淀,使用前必須放在65℃水浴使沉淀徹底溶解并充分搖勻后再取用,且骨粉加到溶液A中后會(huì)特別黏稠,需使勁振蕩混勻。)
4. 65℃水浴放置30分鐘。
5. 加入0.3mL的溶液B和0.2mL的自備lǜ仿,充分振蕩30秒混勻。
6. 12000rpm室溫離心3分鐘,小心將上清液轉(zhuǎn)移到一個(gè)新的塑料離心管中。
7. 加入0.5mL溶液C,顛倒混勻。
8. 將混合液分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,每次轉(zhuǎn)移后需要 12000rpm室溫離心1分鐘,并棄收集管中的穿透液。
9. 加入0.5mL通用洗柱液到離心吸附柱中,12000rpm室溫離心1分鐘,棄收集管中穿透液。
10. 再加入0.5mL通用洗柱液到離心吸附柱中,12000rpm室溫離心1分鐘,棄收集管中穿透液。
11. 12000rpm室溫離心半分鐘,棄含穿透液的收集管。此步干甩十分重要,否則殘留的液體會(huì)抑制后續(xù)的PCR。
12. 將離心吸附柱套入到一個(gè)自備的干凈的1.5mL塑料離心管中,在離心吸附柱的濾膜的中部加入30μL DNA洗脫液,然后室溫放置2分鐘。如果先將DNA洗脫液預(yù)熱到60-80℃再使用,效果更佳。
13. 12000~15000g室溫離心1分鐘,離心管中收集的樣品即為骨骼DNA。
14. 取少量進(jìn)行電泳檢測(cè)。注意:一般DNA都呈現(xiàn)彌散狀,分布在20 Kb到100bp這一廣泛的范圍,其比例跟骨骼(或骨粉)的新鮮程度、加工過(guò)程(對(duì)骨粉)等因素密切相關(guān)。
15. DNA樣品可以直接用于PCR,也可放-20℃長(zhǎng)期保存。

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