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產(chǎn)品詳情

WH0018 廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心

  • 產(chǎn)品/服務(wù):WH0018 廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心
  • 型 號(hào):WH0018
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-31
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1001
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持,本品用于科研目的,本品質(zhì)量穩(wěn)定,價(jià)位合理,需要廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心等DNA提取純化產(chǎn)品的客戶,請(qǐng)到我公司官網(wǎng)聯(lián)系我們。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法)
英文名稱:Extraction kit for genomic DNA from blood/cell/tissue
產(chǎn)品貨號(hào):WH0018
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次

本試劑盒適用于小體系全血(≤1ml)、培養(yǎng)細(xì)胞和動(dòng)物組織等基因組DNA的廣譜性提取試劑盒。試劑盒采用了獨(dú)特的細(xì)胞裂解體系,使蛋白變性,結(jié)合硅膠膜特異吸附核酸的原理,快速純化得到基因組DNA。使用本試劑盒純化所得的DNA無蛋白、核酸酶污染,可直接進(jìn)行PCR、酶切和Southern雜交等實(shí)驗(yàn)操作。

產(chǎn)品特點(diǎn):
·簡(jiǎn)單快速:1h內(nèi)即可獲得超純的基因組DNA。
·廣泛:適用于血液、多種動(dòng)物細(xì)胞和動(dòng)物組織等。
·超純:獲得的DNA純度高,可直接用于PCR、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

材料用量和純化核酸得率:
樣本 處理量 DNA得率(μg)
哺乳動(dòng)物全血 100~500μl 3~10
禽類、兩棲類全血 5μl 5~10
培養(yǎng)細(xì)胞 106~10Cells 5~30
動(dòng)物組織 30mg 10~30
小鼠尾 1.2cm(尖部) 10~25
大鼠尾 0.6cm(尖部) 20~40


組織勻漿以及裂解充分圖例:
組織勻漿以及裂解充分圖例
組織取樣量圖例:
組織取樣量圖例

試劑盒組成:
組分 50T 200T
緩沖液GA 15ml 50 ml
緩沖液GB 15ml 52 ml
緩沖液GD 13 ml 50 ml
漂洗液PW 15ml 50 ml
洗脫緩沖液TE 15ml 60 ml
Proteinase K 1 ml 4×1 ml
吸附柱CB3 50個(gè) 200個(gè)
收集管(2 ml) 50個(gè) 200個(gè)

保存條件:室溫(15-25℃)干燥條件下,可保存12個(gè)月,更長時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下,若溶液產(chǎn)生沉淀,使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間,必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min,以溶解沉淀。

選配試劑:紅細(xì)胞裂解液(Red Cell Lysis Buffer目錄號(hào):WH0229);RNase A(100mg/ml)(目錄號(hào):WH0217)

注意事項(xiàng):(請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1.次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇。
2.樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融,否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下降。
3.若緩沖液GA或GB中有沉淀,可在37℃水浴中重新溶解,搖勻后使用。
4.所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī),室溫下離心。

使用方法:
使用前請(qǐng)先在緩沖液GD和漂洗液PW中加入無水乙醇,加入體積請(qǐng)參照瓶上的標(biāo)簽。

1.處理材料
  a.如提取材料為血液,可直接使用200μl新鮮、冷凍或加入各種抗凝劑的血液,不足200μl可加緩沖液GA補(bǔ)足;
  注意:如需處理更大體積血液,如300 μl-1 ml,應(yīng)按以下步驟操作:在樣品中加入3倍體積紅細(xì)胞裂解液(例如,300 μl血液加入900 μl紅細(xì)胞裂解液),顛倒混勻,室溫放置5 min,期間再顛倒混勻幾次。10000rpm(~11500×g)離心1 min(若離心機(jī)zuì高轉(zhuǎn)速不允許,可3000 rpm(~3400×g)離心5 min),吸去上清,留下白細(xì)胞沉淀,加200μl緩沖液GA,振蕩至徹底混勻。
  紅細(xì)胞裂解液本公司另外有售(目錄號(hào):WH0229),可根據(jù)需要來決定購買。
  b.如果處理血樣為禽類、鳥類、兩棲類或更低級(jí)生物的抗凝血液,其紅細(xì)胞為有核細(xì)胞,因此處理量5-20 μl,可加緩沖液GA補(bǔ)足200μl后進(jìn)行下面的裂解步驟。
  c.貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞應(yīng)先處理為細(xì)胞懸液,然后10000rpm(~11,200×g)離心1 min,倒盡上清,加200μl緩沖液GA,振蕩至徹底懸浮;
  d.動(dòng)物組織(脾組織用量應(yīng)少10 mg)應(yīng)先打碎處理為細(xì)胞懸液,然后10,000rpm(~11,200×g)離心1 min,倒盡上清,加200μl緩沖液GA,振蕩至徹底懸浮。
  注意:如果需要去除RNA,可加入4 μl RNaseA(100mg/ml)溶液(客戶自備,目錄號(hào):WH0217),振蕩15 sec,室溫放置5 min。
2.加入20 μl Proteinase K溶液,混勻。
  a.提取血液基因組時(shí),只需加入Proteinase K混勻,即可繼續(xù)進(jìn)行下一步。
  b.提取細(xì)胞基因組時(shí),只需加入Proteinase K混勻,即可繼續(xù)進(jìn)行下一步。
  c.提取組織基因組時(shí),加入Proteinase K混勻后,在56℃放置,直至組織溶解,簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠,再進(jìn)行下一步驟。
  注意:不同組織裂解時(shí)間不同,通常需1-3 h即可完成(鼠尾需要消化過夜)。不會(huì)影響后續(xù)操作。每小時(shí)顛倒混合樣品2-3次,用水浴振蕩器也可。
3.加入200μl緩沖液GB,充分顛倒混勻,70℃放置10min,溶液應(yīng)變清亮,簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
  注意:加入緩沖液GB時(shí)可能會(huì)產(chǎn)生白色沉淀,一般70℃放置時(shí)會(huì)消失,不會(huì)影響后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如溶液未變清亮,說明細(xì)胞裂解不徹底,可能導(dǎo)致提取DNA量少和提取出的DNA不純。當(dāng)血液體積≤200μl且沒有采用紅細(xì)胞裂解處理,或是樣本儲(chǔ)存條件不佳,水浴后顏色可能為深褐色,注意溶液中沒有團(tuán)塊等沉淀。
4.加人200μl無水乙醇,充分振蕩混勻15 sec,此時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀沉淀,簡(jiǎn)短離心以去除管蓋內(nèi)壁的水珠。
5.將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)吸附柱CB3中(吸附柱放入收集管中),12000rpm (~13400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放回收集管中。
6.向吸附柱CB3中加入500 μl緩沖液GD (使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12,000rpm (~13400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
7.向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm (~13400×g)離心30 sec,倒掉廢液,將吸附柱CB3放入收集管中。
8.重復(fù)操作步驟7。
9.將吸附柱CB3放回收集管中,12000rpm(~13400×g)離心2 min,倒掉廢液。將吸附柱CB3置于室溫放置數(shù)分鐘,以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
  注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
10.將吸附柱CB3轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中,向吸附膜的中間部位懸空滴加50-200μl洗脫緩沖液TE,室溫放置2-5 min,12000rpm (~13400×g)離心2 min,將溶液收集到離心管中。
  注意:洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50 μl,體積過小影響回收效率。洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi),pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率;且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防DNA降解。為增加基因組DNA的得率,可將離心得到的溶液再加入吸附柱CB3中,室溫放置2 min,12000rpm(~13400×g )離心2 min。

根據(jù)您的關(guān)注的廣譜基因組DNA提取試劑盒(離心吸附柱法),兩棲類全血DNA提取試劑盒,動(dòng)物組織基因組DNA提取試劑盒,禽類全血基因組DNA提取試劑盒,哺乳動(dòng)物全血基因組DNA提取試劑盒,動(dòng)物培養(yǎng)細(xì)胞基因組DNA提取試劑盒,您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求:



名稱:紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化)
貨號(hào):BTN60403
規(guī)格:250mL
本品用于快速裂解哺乳動(dòng)物全血中的紅細(xì)胞而基本不破壞白細(xì)胞和其他淋巴細(xì)胞的完整性。由于紅細(xì)胞是血液的主要細(xì)胞成份,不含DNA和RNA,其所含血紅素能抑制PCR反應(yīng),所以先用本產(chǎn)品裂解紅細(xì)胞,再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1.快速,一次處理只需要2-3分鐘。處理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白質(zhì)。
2.,一次處理能裂解80%以上的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞,一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴(kuò)容性好,可以一次處理多達(dá)幾十毫升的樣品,也可以處理100μL的血液。
4. 兼容性好,可以與市場(chǎng)上大多數(shù)血液DNA提取試劑盒結(jié)合使用。

儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸,4℃保存,有效期一年。

使用方法:
1.在裝有抗凝血液的離心管中,按1:1的比例加入紅細(xì)胞裂解液A型并輕柔顛倒混勻。
2. 5000-10000 g室溫離心2分鐘,小心吸棄棄上清。
3. 將細(xì)胞沉淀重懸于1/2 體積的紅細(xì)胞裂解液A型中,輕柔吹打混勻后5000-10000g室溫離心2分鐘。
4.沉淀即為去除了紅細(xì)胞的血液細(xì)胞,可以直接用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

名稱:痰液DNA提取試劑盒
貨號(hào):BTN111201
規(guī)格:50次
痰液是重要的檢測(cè)樣品,可以用于診斷肺癌,肺結(jié)核等各種疾病。但是從痰液中純化DNA十分棘手,為此本公司開發(fā)了本產(chǎn)品,專用于從痰液或其他上呼吸道分泌樣品中純化DNA,用于后續(xù)的分子生物學(xué)分析。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 每次可以處理10-20mL痰液,得到2-5μg DNA。
2. 純度高,可直接用于后續(xù)得PCR檢測(cè)。
3.一管式操作,減少污染,節(jié)約成本。
4.含痰液保存液(溶液A),便于取樣和運(yùn)輸。
5. 環(huán)保,不需要使用苯酚和lǜ仿等有毒的有機(jī)溶液。

試劑盒組成:
成分 規(guī)格
溶液A(痰液細(xì)胞固定液) 500ml
溶液B(痰液解稠劑) 500ml
溶液C 30ml
說明書 1份


儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸和保存,有效期一年。

使用方法:
一:痰標(biāo)本的獲取與保存(注意:痰液以及下列操作的廢棄液都可能含有致病性的結(jié)核桿菌等致病菌,需按傳染源相關(guān)規(guī)定流程進(jìn)行操作)
1. 每例患者在常規(guī)痰標(biāo)本采樣時(shí),zuì好連續(xù)三天采集三次樣品以防誤差。具體做法是先在每個(gè)50mL的痰液收集管內(nèi)新鮮加入10mL溶液A和10mL溶液B,待患者晨起漱口后,咳深部痰7~8口(約10-20mL),收集到裝有溶液A和溶液B混合液的痰液管收集內(nèi),混勻后儲(chǔ)于4℃冰箱或陰涼處。第二、三天重復(fù)此操作。取足三管后一起送實(shí)驗(yàn)室,4℃冰箱保存直到使用。
2. 使用時(shí),在室溫反復(fù)振搖裝有樣品(總體積約30-40mL)的痰液收集管5~10分鐘,充分混勻直到痰液中無粘稠痰塊而呈均勻的液相。
3. 4℃2500g離心5分鐘,棄上清。
4.沉淀再用自備的PBS液洗兩遍。
5. 所得沉淀可以直接用于涂片,用于比較細(xì)胞形態(tài)學(xué)分析。也可以將細(xì)胞沉淀在0.2mL PBS緩沖液中重懸后轉(zhuǎn)入1.5mL螺旋蓋塑料離心管,-20℃冰箱長期保存,或立即用于下步的DNA提取。為避免蓋子崩開而出現(xiàn)交叉污染或痰液的分枝桿菌污染環(huán)境,建議不要使用壓蓋式塑料離心管。同時(shí)zuì好設(shè)置一個(gè)陽性和一個(gè)陰性對(duì)照。
二:DNA提取
6.在上步所得的0.2mL樣品中加入0.6mL溶液C。溶液C容易形成沉淀,用前需37℃加熱融化并搖晃均勻。
7.室溫放置10分鐘。此間可以在每個(gè)管外壁上做個(gè)標(biāo)記,以在下步區(qū)別向心面和離心面。
8. 振蕩數(shù)秒后加入0.7mL自備的異丙醇,旋緊蓋后振蕩30秒混勻。
9. 把離心管的向心面對(duì)向轉(zhuǎn)頭,13,000-15000g室溫離心至少15分鐘。
10.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時(shí)可能看不見)。
11. 加入1.0mL 70%乙醇,振蕩數(shù)秒后 15000g室溫離心5分鐘。注意:在離心機(jī)中放置離心管時(shí)將其向心面對(duì)向轉(zhuǎn)頭的中央。
12.小心移棄上清,注意不要觸及管底和管壁離心面的DNA沉淀(此時(shí)呈膜狀沉淀)。
13. 將離心管放回離心機(jī)再短暫離心數(shù)秒,然后用移液器移棄約50μL殘留液體(70%乙醇),否則它會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)。
14. 加入200μl RNase-free水,用移液槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁離心面的膜狀DNA沉淀,溶液將呈混濁狀,含少量不溶,短暫離心后存上清(含DNA)。
15. 直接取適量用于PCR,樣品使用量不超過PCR體系的1/2。剩余DNA樣品可以室溫放置2小時(shí),也可保存于-80℃保存一個(gè)月。

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