λ噬菌體DNA提取試劑盒是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于科研目的，我公司的λ噬菌體DNA提取試劑盒品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括λ噬菌體DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：λ噬菌體DNA提取試劑盒
英文名稱：Lambda phage genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：ALH164
產(chǎn)品規(guī)格：50次|100次

本試劑盒適用于快速λ噬菌體DNA提取，將λ噬菌體裂解培養(yǎng)物離心后的上清，先用RNase A /DNase I混合酶消化去除殘留的宿主菌DNA/RNA，沉淀收集噬菌體，噬菌體被SDS裂解，殘留碎片通過沉淀離心去除掉。裂解物上清中的λ噬菌體DNA在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜，再通過一系列快速的漂洗－離心的步驟，將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除，zuì后低鹽的洗脫緩沖液將λ噬菌體DNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。λ噬菌體載體廣泛用于文庫篩選，目的克隆培養(yǎng)獲得大量的噬菌體顆粒需要提取λ噬菌體DNA來開展測(cè)序等后續(xù)工作。

試劑盒組份(50次)：
RNase A ————————20mg
DNase I ————————50mg
噬菌體沉淀液——————100ml
裂解緩沖液———————30ml
雜質(zhì)沉淀液———————5ml
結(jié)合液LB————————20ml
漂洗液WB————————15ml
洗脫緩沖液EB——————10ml
吸附柱AC————————50個(gè)
收集管(2ml) ——————50個(gè)

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.不需要使用有毒的苯酚等試劑，也不需要乙醇沉淀等步驟。
2.節(jié)省時(shí)間，簡(jiǎn)捷，可用于液體培養(yǎng)裂解物和固體培養(yǎng)板的提取，單個(gè)樣品操作一般可在1.5小時(shí)內(nèi)完成。
3.產(chǎn)量高，典型的產(chǎn)量10ml λ噬菌體裂解培養(yǎng)物上清可以提取約10μg λ噬菌體DNA。
4.多次柱漂洗確保高純度，OD260/OD280典型的比值達(dá)1.7～1.9?？梢灾苯佑脕砻盖泻蜏y(cè)序。

注意事項(xiàng)：
1. 使用轉(zhuǎn)速可以達(dá)到13000rpm的冷凍離心機(jī)。
2. 開始實(shí)驗(yàn)前將需要的水浴先預(yù)熱到37℃?zhèn)溆谩?br /> 3. 需要自備氯fǎng，20％SDS。
4. 結(jié)合液LB 含有刺激性化合物，操作時(shí)要戴乳膠手套，避免沾染皮膚，眼睛和衣服。若沾染皮膚、眼睛時(shí)，要用大量清水或者生理鹽水沖洗。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

本制品別名：λ噬菌體DNA提取試劑盒|λ單鏈DNA提取試劑盒|λ基因組提取試劑盒

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名稱：無內(nèi)毒素質(zhì)粒中提試劑盒
貨號(hào)：WE0166
規(guī)格：50次
  內(nèi)毒素是質(zhì)粒提取中常見的污染物，由于真核細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感，因此，如果質(zhì)粒中含有內(nèi)毒素會(huì)大大降低真核細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率。本試劑盒提供一種簡(jiǎn)單、快捷、提取無內(nèi)毒素質(zhì)粒的新方法，提取的質(zhì)粒zuì大限度去除內(nèi)毒素，并能有效去除基因組DNA、RNA、蛋白等污染。

  本試劑盒通過堿裂解法裂解細(xì)胞，硅基質(zhì)膜專一的結(jié)合質(zhì)粒DNA，同時(shí)采用特殊的緩沖液系統(tǒng)和除內(nèi)毒素過濾柱，有效去除內(nèi)毒素、蛋白等雜質(zhì)。由本試劑盒所得質(zhì)粒純度高、質(zhì)量穩(wěn)定，特別適用于細(xì)胞轉(zhuǎn)染，同時(shí)也可用于DNA測(cè)序，PCR，基于PCR的突變，體外轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)化細(xì)菌，內(nèi)切酶消化等下游實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組成：

組份	50次
Buffer P1	30ml
Buffer P2	30ml
Buffer E3	30ml
Buffer PS	15ml
Buffer PW(濃縮液)	10ml
Endo-Free Buffer EB	10ml
RNase A(10 mg/ml)	600μl
過濾柱FM及收集管	50套
吸附柱DL及收集管	50套

自備試劑：無水乙醇、異丙醇。

實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備及重要注意事項(xiàng)：
1、所有組分可在干燥、室溫(15～30℃)環(huán)境穩(wěn)定保存1年，更長(zhǎng)時(shí)間保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可穩(wěn)定保存6個(gè)月。
2、次使用前，將RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混勻，置于2–8℃保存，使用前需在室溫中放置一段時(shí)間，恢復(fù)至室溫后使用。
3、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer PW中加入無水乙醇。
4、使用前請(qǐng)先檢查Buffer P2 和Buffer E3是否出現(xiàn)結(jié)晶或沉淀，如有結(jié)晶或沉淀現(xiàn)象，可在37℃水浴幾分鐘，即可恢復(fù)澄清。
5、注意不要直接接觸Buffer P2和Buffer E3，使用后應(yīng)立即蓋緊蓋子。
6、提取質(zhì)粒的量和純度與細(xì)菌培養(yǎng)濃度、菌株種類、質(zhì)粒大小、質(zhì)粒拷貝數(shù)等因素有關(guān)。

操作步驟：
1、取5-15ml過夜培養(yǎng)的菌液，加入離心管(自備)中，13000rpm(~～～16200×g)離心1分鐘收集細(xì)菌，盡量吸棄全部上清。
2、向留有菌體沉淀的離心管中加入500μl Buffer P1(請(qǐng)先檢查是否已加入RNase A)，使用移液器或渦旋振蕩器充分混勻，懸浮細(xì)菌沉淀。
注意：如果菌塊未徹底混勻，將會(huì)影響裂解效果，使提取量和純度偏低。
3、向離心管中加入500μl Buffer P2，溫和地上下顛倒混勻8-10次，使菌體充分裂解，室溫放置3-5分鐘。此時(shí)溶液應(yīng)變得清亮粘稠。
注意：溫和混勻，不要?jiǎng)×艺鹗?，以免打斷基因組DNA，造成提取的質(zhì)粒中混有基因組DNA片段。如果溶液未變得清亮，提示可能菌量過大，裂解不徹底，應(yīng)減少菌體量。
4、向離心管中加入500μl Buffer E3，立即上下顛倒混勻8-10次，此時(shí)出現(xiàn)白色絮狀沉淀，室溫放置5分鐘。13000rpm離心5分鐘，吸取上清，將上清加入過濾柱FM中(已裝入收集管)，13000rpm離心1分鐘過濾，將收集管中的濾液轉(zhuǎn)移到離心管(自備)中。
注意：
1)Buffer E3 加入后應(yīng)立即混勻，避免產(chǎn)生局部沉淀。
2)吸附柱的zuì大容積為750μl，所以上清液請(qǐng)分兩次過濾，并混合于同一自備離心管中。
5、向?yàn)V液中加入450μl異丙醇，上下顛倒混勻。
6、柱平衡：向已裝入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS，13000rpm離心2分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、將步驟5中濾液與異丙醇的混合溶液轉(zhuǎn)移到平衡好的吸附柱(已裝入收集管)中。
8、13000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的zuì大容積為750μl，所以第5步中所得溶液分多次過柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇)，13000rpm離心1分鐘，倒掉收集管中的廢液。
10、將吸附柱重新放回收集管中，13000rpm離心1分鐘。
注意：這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除，乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR等)。
11、將吸附柱置于一個(gè)新的離心管(自備)中，向吸附膜的中間部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB，室溫放置2-5分鐘，13000rpm離心2分鐘。-20℃保存質(zhì)粒。
注意：
1)為了增加質(zhì)粒的回收效率，可將得到的溶液重新加入到吸附柱中，室溫放置2-5分鐘，13000rpm離心2分鐘。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴預(yù)熱，適當(dāng)延長(zhǎng)吸附和洗脫的時(shí)間，可以增加提取效率。
2)質(zhì)?？截悢?shù)較低或>10 kb時(shí)，Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴預(yù)熱，可以增加提取效率。

儲(chǔ)存條件：室溫(15～30℃)

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