北京百奧萊博供應(yīng)的磁珠法游離DNA提取試劑盒僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多磁珠法游離DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括磁珠法游離DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：磁珠法游離DNA提取試劑盒
英文名稱：MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號：WE0204
產(chǎn)品規(guī)格：96次

  本試劑盒適用于從血漿、血清、羊水、淋巴液、尿液等無細(xì)胞體液中簡單、的純化回收游離DNA(Free circulating/Cell-free DNA)。在高鹽存在時，游離DNA結(jié)合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后，高純度的游離DNA被洗脫于Buffer EB或去離子水中。游離DNA的得率與樣品類型、儲存條件、時間以及個體間差異有很大關(guān)系。純化得到的游離DNA質(zhì)量穩(wěn)定、可靠，可用于定量PCR以及二代測序建庫等下游實驗。該試劑盒還可用于病毒DNA的提取。

試劑盒組成：

組份	96次
Buffer KCL	96ml
Buffer KCW1(濃縮液)	72ml
Buffer KCW2(濃縮液)	60ml
Buffer EB	30ml
蛋白酶K	2×25mg
蛋白酶K 儲存液	2×1.25ml
Magbeads PN	4ml

自備試劑：異丙醇、無水乙醇。

實驗前準(zhǔn)備及重要注意事項：
1、向蛋白酶* 粉末中加入用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 儲存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置，避免反復(fù)凍融，以免影響其活性。
2、樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取率低。
3、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說明在Buffer KCW1和Buffer KCW2中加入無水乙醇并做好標(biāo)記。
4、Magbeads嚴(yán)禁冰凍、離心。冰凍和離心可能會對Magbeads造成不可逆的損害。
5、Magbeads在使用前一定要渦旋震蕩20秒使其充分混勻。

操作步驟：
次使用前請檢查Buffer KCW1和Buffer KCW2中是否已加入無水乙醇。
1、向1.5ml的離心管中加入20 ul 蛋白酶K ，之后加入300 ul血漿。
2、向上一步的離心管中加入300 ul Buffer KCL，渦旋震蕩5秒鐘使其充分混勻后將離心管放于56℃水浴鍋中孵育10分鐘。
3、將上一步的離心管從水浴鍋中取出，短暫離心后室溫放置5分鐘。
4、向上一步的離心管中加入150 ul異丙醇，渦旋震蕩混勻后短暫離心。之后向離心管中加入40 ul徹底混勻的Magbeads，渦旋震蕩5秒鐘后放于25℃、1500 rpm的恒溫混勻儀上震蕩10分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于懸浮狀態(tài))或連續(xù)顛倒混勻10分鐘。
注意：如果樣品量較多，可將異丙醇與Magbeads提前按比例混勻，之后同時加入裂解產(chǎn)物中。
5、將上一步的離心管放于磁力架上靜置1分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側(cè)壁后徹底棄去溶液(保持離心管固定于磁力架上)，期間避免接觸Magbeads。
6、將離心管從磁力架上取下，加入500 ul Buffer KCL后渦旋點震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒溫混勻儀上震蕩2分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于懸浮狀態(tài))。之后將離心管固定于磁力架上靜置2分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側(cè)壁后棄去溶液。
注意：如果樣品為血清、羊水、淋巴液或尿液，Buffer KCL漂洗步驟可去除。
7、將離心管從磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW1后渦旋點震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒溫混勻儀上震蕩2分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于懸浮狀態(tài))。之后將離心管固定于磁力架上靜置1分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側(cè)壁后輕輕顛倒磁力架將離心管蓋上的雜質(zhì)洗落后棄去溶液，期間避免接觸Magbeads。
8、將離心管從磁力架上取下，加入750 ul Buffer KCW2后渦旋點震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒溫混勻儀上震蕩2分鐘(震蕩過程中確保Magbeads處于懸浮狀態(tài))。之后將離心管固定于磁力架上靜置1分鐘，待Magbeads完全吸附于離心管側(cè)壁后輕輕顛倒磁力架將離心管蓋上的雜質(zhì)洗落后棄去溶液，期間避免接觸Magbeads。
9、重復(fù)步驟8。
10、保持離心管固定于磁力架上，用移液器進(jìn)一步去除離心管管底和管蓋上的溶液，之后室溫放置5-10分鐘，使乙醇揮發(fā)干凈。
注意：如果離心管壁上有液珠，可向離心管中加入800 ul無水乙醇。蓋蓋后顛倒離心管，之后徹底去除無水乙醇。
11、將離心管從磁力架上取下，加入30-100 ul Buffer EB或去離子水。渦旋震蕩時Magbeads完全懸浮于洗脫液中后將其放入56℃、1500 rpm的恒溫混勻儀上震蕩洗脫10分鐘或放于56℃水浴鍋中孵育10分鐘，期間每隔3分鐘渦旋震蕩10秒鐘。
12、將上一步的離心管放置于磁力架上靜置2分鐘，待Magbeads完全吸附后用移液器將洗脫液轉(zhuǎn)移至新的離心管中-20℃保存?zhèn)溆谩?br />
儲存條件：室溫(15～30℃)

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名稱：非凍型組織DNA保存液
貨號：BTN3660
規(guī)格：250mL
本品是我公司推出的在室溫條件下長期保存DNA樣品的保存液。它能迅速滲入細(xì)胞內(nèi)，通過抑制DNase的活性而長期保證DNA的完整性。

產(chǎn)品特點：
1. 保存時間長，可室溫保存動植物組織長達(dá)兩年，保護(hù)DNA不被降解。
2. 安全可靠，本產(chǎn)品無害，從DNA保存液保存的樣品中提得的DNA可用于酶切和PCR等分子生物學(xué)實驗。
3. 使用簡單，直接把新鮮的動植物樣品浸在DNA保存液中即可。
4.可廣泛用于各種動植物標(biāo)本的野外采集。

儲存條件：室溫運輸及保存，有效期兩年。

使用方法：

步：準(zhǔn)備工作
1.估計完全浸沒樣品所需要Tissue DNA保存液的體積。
注：1g 組織約需10mL Tissue DNA保存液。
2.標(biāo)記收集管并加入估計所需量的Tissue DNA保存液。

第二步：樣品的處理
1.以zuì快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊。
注：鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產(chǎn)品中保存，有蠟質(zhì)保護(hù)層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
2.將組織碎塊完全浸沒于收集管的Tissue DNA保存液中。

第三步：樣品的存放
將收集管存放于溫度適當(dāng)?shù)牡胤剑４鏈囟炔灰陀?℃。

第四步：樣品的使用
1.從存放處取出樣品，用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護(hù)液中取出。
2.立即開始DNA提取。

名稱：柱式動物DNA提取試劑盒
貨號：BTN71206
規(guī)格：50次
本試劑盒是在我司動物DNA提取試劑盒的基礎(chǔ)上改良而得的柱式升級產(chǎn)品，主要用于快速提取新鮮或冷凍的動物組織中的基因組DNA。

產(chǎn)品特點：
1. DNA更加純凈，大多數(shù)DNA樣品的OD260/280值在1.8-1.9之間。
2. DNA產(chǎn)率一般在200μg/g左右(跟組織種類密切相關(guān))。
3.可直接用于PCR、酶切、雜交等后續(xù)反應(yīng)。
4. 操作更加簡單，離心吸附操作代替離心沉淀，整個過程室溫操作約10分鐘，適合大規(guī)模樣品處理。
5. 安全，本試劑盒對人體，無腐蝕性和刺激性氣味。
6. 高，質(zhì)量和國外同類產(chǎn)品相當(dāng)，但價格更。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	40ml
溶液B	20ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液2.0	10ml
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸和保存、有效期一年。

使用方法：
注意：溶液A容易產(chǎn)生沉淀，溶液B十分粘稠，用前均需要在65℃水浴中加熱使沉淀溶解或粘稠度降低，用前充分搖勻。

1. 根據(jù)使用材料的不同進(jìn)行下列操作：
a)對貼壁細(xì)胞：吸盡培養(yǎng)液，在每10平方厘米細(xì)胞中加入0.8mL預(yù)熱的溶液A，用槍充分吹打以確保細(xì)胞全部裂解，然后把裂解液轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中。
b)對懸浮細(xì)胞：離心收集細(xì)胞，吸盡液體，在每1-5×106懸浮細(xì)胞中加入0.8mL預(yù)熱的溶液A，用槍充分吹打以確保細(xì)胞全部裂解。然后把裂解液轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中。如果是fibroblasts或carcinoma細(xì)胞，0.8mL溶液A的細(xì)胞使用量不要超過1×106個細(xì)胞。
c)對新鮮或冷凍的組織：先將剪切成小塊的新鮮組織或冷凍保存的組織放入10mL或15mL塑料離心管中，每50-100mg組織加0.8mL預(yù)熱的溶液A，用剪切式勻漿器勻漿30秒左右，然后把裂解液轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中。對肝、脾、胰、腎等細(xì)胞分裂十分旺盛的組織(細(xì)胞中含大量正在復(fù)制的DNA)，建議組織的使用量不要超過50mg。
d)對DNAhold保存組織：先用紙吸去DNAhold液體后再剪切成小塊，其余操作同新鮮或冷凍組織的處理。
2. 加入0.4mL預(yù)熱的溶液B到裂解液中。由于溶液B十分粘稠，可將1mL槍頭剪掉一截再用，也可以用稱量方法加0.4 g。加入溶液B后需要顛倒數(shù)次充分混勻。
3. 65℃水浴5-10分鐘。如果室溫放置，DNA產(chǎn)量將降低10-20%。
4. 加入0.2mL自備氯fǎng，振蕩器上充分振蕩混均30秒，此時溶液將呈乳白色。一定要確保離心管底的液體被震蕩起來。
5. 12000～15000g室溫離心2分鐘。上清透明，中間層為白膜(蛋白層)。
6.小心將上清液平均轉(zhuǎn)移到兩個新的離心管中，避免觸及中間的白膜。
7. 每個管中加入1.5倍體積的溶液C，充分顛倒混勻。
8. 分兩次上柱(即先轉(zhuǎn)移一半的混合液到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘，12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液，然后再將剩下的混合液到離心吸附柱中，室溫放置2分鐘，12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液)。
9. 加0.7mL通用洗柱液到離心吸附柱中，12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
10. 加0.3mL通用洗柱液到離心吸附柱中，12000～15000g室溫離心半分鐘，棄穿透液。
11. 12000～15000g室溫再離心半分鐘。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會污染DNA。
12.室溫放置半分鐘使殘留乙醇揮發(fā)。
13. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的1.5mL塑料離心管中，加入50-100μL DNA洗脫液2.0，室溫放置離心吸附柱1-2分鐘。
14. 12000～15000g室溫離心半分鐘，離心管中溶液即為DNA樣品，可以立即使用或存放于冰箱待用。

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