WE0179 口腔拭子基因組DNA提取試劑盒

產(chǎn)品簡介
口腔拭子基因組DNA提取試劑盒的品牌是百奧萊博,是優(yōu)質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品,本制品僅用于生物化學(xué)研究方面,口腔拭子基因組DNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細(xì)介紹
特別提示:包括口腔拭子基因組DNA提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:口腔拭子基因組DNA提取試劑盒
英文名稱:Swab Genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號:WE0179
產(chǎn)品規(guī)格:50次|200次
本試劑盒提供一種簡單快速分離純化口腔拭子樣本總DNA的方法。該試劑盒采用可特異性結(jié)合DNA的硅基質(zhì)膜和獨(dú)特的緩沖系統(tǒng),專一吸附DNA,每個拭子可得到0.5-3.5μg基因組DNA,提取的DNA片段大、純度高、質(zhì)量穩(wěn)定可靠。適用于酶切、PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗。
試劑盒組成:
組份 | 50次 | 200次 |
Buffer GR | 25ml | 120ml |
Buffer GL | 25ml | 120ml |
Buffer GW1(濃縮液) | 13ml | 52ml |
Buffer GW2(濃縮液) | 15ml | 75ml |
Buffer GE | 15ml | 60ml |
蛋白酶K | 25mg | 90mg |
蛋白酶K 儲存液 | 1.25ml | 5ml |
吸附柱DS及收集管 | 50套 | 200套 |
離心管(1.5ml) | 50個 | 200個 |
產(chǎn)品特點(diǎn):
1、采用硅基質(zhì)膜原理,簡單、快速從口腔拭子中提取基因組DNA。
2、提取的基因組DNA片段大、純度高。
3、單個拭子樣本得率達(dá)到0.5-3.5μg。
自備試劑:無水乙醇。
實驗前準(zhǔn)備及重要注意事項:
1、向蛋白酶K 中加入用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 儲存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿長時間室溫放置,避免反復(fù)凍融,以免影響其活性。
2、次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。
3、使用前若發(fā)現(xiàn)Buffer GL有沉淀,請將Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部離心步驟可在室溫下進(jìn)行。
5、取樣:使用口腔拭子在口腔內(nèi)壁擦拭6次,晾干2小時保存,為確保樣本不被食物或飲料污染,取樣前30分鐘內(nèi)請勿進(jìn)食和飲水。
操作步驟:
1.將口腔拭子的棉簽用剪刀從桿上剪下,置于2ml的離心管(自備)中,加入400μl Buffer GR。
注意:如需無RNA污染的基因組DNA,可加入4μl濃度為100 mg/ml 的RNase A溶液(貨號:WE0225S),震蕩混勻。
2.加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL,立即渦旋震蕩15秒,充分混勻。
注意:加入Buffer GL后立即充分混勻;不可將蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3.56℃放置10分鐘,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
4.加入400μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻,短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
注意:加入無水乙醇后可能會產(chǎn)生白色沉淀,不會影響后續(xù)實驗。
5.將上步所得溶液和沉淀分兩次加入到已裝入收集管的吸附柱中,一次zuì多不超過700μl 。12000rpm(~~13400×g)離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm離心3分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需進(jìn)一步提高DNA純度,可重復(fù)步驟7。
8.12000rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫數(shù)分鐘,以徹底晾干。
注意:這一步的目的是將吸附柱中殘余的乙醇去除,乙醇的殘留會影響后續(xù)的酶促反應(yīng)(酶切、PCR等)。
9.將吸附柱置于一個新的1.5ml離心管中,向吸附柱的中間部位懸空加入50μl Buffer GE或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12000rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存。
注意:
1)如果下游實驗對pH值或EDTA敏感,可以用滅菌水洗脫。洗脫液的pH值對洗脫效率有很大影響,若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH將水的pH值調(diào)到此范圍),pH值低于7.0時洗脫效率不高。
2)若需長期保存,推薦用Buffer GE洗脫并于-20℃保存。
儲存條件:室溫(15~30℃)。
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