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產(chǎn)品詳情

BTN60802 柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒

  • 產(chǎn)品/服務(wù):BTN60802 柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒
  • 型 號:BTN60802
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-25
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數(shù):1014
產(chǎn)品簡介

北京百奧萊博供應(yīng)的柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒用于科研試驗(yàn),柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一,質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品,價(jià)格非常優(yōu)惠,目前正熱烈促銷中,恭候您的咨詢訂購。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱:柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒
英文名稱:Column Bacterial DNA Isolation Kit
產(chǎn)品貨號:BTN60802
產(chǎn)品規(guī)格:50次

本產(chǎn)品是在百奧萊博在"百無憂"細(xì)菌DNA提取試劑盒 基礎(chǔ)上開發(fā)的柱式升級產(chǎn)品,可以用于大多數(shù)革氏陽性和陰性細(xì)菌基因組DNA的快速提取。

特點(diǎn):
1. 操作簡單,整個(gè)過程不到20分鐘。
2. 產(chǎn)率一般在5-20μg/mL 過液培養(yǎng)的飽和菌液(10^8~10^9個(gè)細(xì)胞)。
3. OD260/280一般在1.8以上,可直接用于PCR、酶切、雜交等實(shí)驗(yàn)。
4. DNA片段長度一般在40-50 Kb左右。
5. 每次提取可以處理0.1-1.5mL的細(xì)菌,也可以使用菌落。
6. 價(jià)廉物美,與國外同類產(chǎn)品相比質(zhì)量相當(dāng),但價(jià)格。
7. 安全,本試劑盒對人體無害,無腐蝕性和刺激性氣味。

產(chǎn)品組成:
組分 編號 規(guī)格
溶菌酶干粉 BTN100406 600mg
溶液A BTN60802A 15mL
溶液B BTN60802B 7.5mL
溶液C BTN60802C 30mL
離心吸附柱 BTN60911 50套
通用洗柱液 BTN60408 50mL
DNA洗脫液2.0 BTN111205 10mL


保存條件:常溫(溶菌酶干粉需要4℃或-20℃保存),有效期一年。

自備試劑:lǜ仿、自備無菌水

使用方法:
注意:溶液A和溶液B 容易產(chǎn)生沉淀,溶液B 十分粘稠,均需要放置在65℃預(yù)熱使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分搖勻。

一、對革氏陰性細(xì)菌樣品,不需用溶菌酶
1. 將0.1-1.5mL過夜培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中, 12,000rpm室溫離心1分鐘沉淀細(xì)菌,棄上清。
2. 加入300uL預(yù)熱的溶液A 到細(xì)菌沉淀中,充分吹打均勻。
3. 再加入150uL預(yù)熱的溶液B 到離心管中,顛倒數(shù)次混勻。此時(shí)溶液中可能有白色絲狀懸浮物產(chǎn)生。由于溶液B 比較粘稠,可以采取稱量方法取用,150μL約等于150-160 mg。也可以將1mL 槍頭剪去一截再吸取。
4. 65℃放置3-5分鐘。如果室溫放置,DNA 產(chǎn)量會降低10-20%。
5. 加入200μl 自備lǜ仿,震蕩混勻10-30 秒,此時(shí)溶液將呈乳白色。
6. 12,000rpm 室溫離心2分鐘。此時(shí)上清液將變得透明,中間層有白膜。小心轉(zhuǎn)移上清液到一個(gè)新的1.5mL 塑料離心管中,避免觸及中間層的白膜。
7. 加入1.5 倍體積(約0. 7mL)的溶液C,顛倒混勻后全部轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中,室溫放置至少2分鐘。
8. 12,000rpm 室溫離心1分鐘,DNA 將吸附在離心吸附柱的膜上,倒棄收集管中的穿透液。
9. 將0.5mL 通用洗柱液加入離心柱中,12,000rpm 室溫離心1分鐘,棄穿透液。
10. 重復(fù)上步操作一次。
11. 空甩半分鐘去除殘留液體,將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到新的1.5mL 離心管中。
12. 加50-100μl 通用洗脫液,室溫放置3-5分鐘。
13. 12,000rpm 室溫離心1分鐘即得DNA 溶液。
14. 由于本產(chǎn)品使用的離心吸附柱吸附DNA的能力較強(qiáng),可以重復(fù)上步操作一次以便得到更多的DNA。
15. 直接取5-10μl 電泳檢測DNA,其余放冰箱備用。

二、對革氏陽性細(xì)菌樣品,需用溶菌酶
1. 將0.1-1.5mL 過夜培養(yǎng)的革氏陽性細(xì)菌12,000rpm 室溫離心1分鐘后, 重懸于0.6mL 溶菌液中(溶菌液配制:30mL 無菌水+600 mg 溶菌酶,配制后zuì好分裝成小管并放-20℃長期保存,每次只用一小管),顛倒混勻5-10 次后放37℃保溫至少30分鐘(有的革氏陽性菌種可能需更長時(shí)間,需要自己根據(jù)不同的細(xì)菌摸索)。
2. 12,000rpm 室溫離心10分鐘,小心棄上清。
3. 后續(xù)處理接上面的革氏陰性細(xì)菌提取步驟中的第2 步。

三、其他注意事項(xiàng)
1. 可以直接使用細(xì)菌菌落提取DNA,操作時(shí)直接將細(xì)菌菌落挑入到溶液A中,后續(xù)操作同上。
2. 從單個(gè)菌落中提取到的DNA 較少,所以只用30μl 通用洗脫液洗脫。

使用效果:
血液DNA提取試劑盒
圖注:用本產(chǎn)品提取1.0mL過夜培養(yǎng)的E.coli Tg1細(xì)菌,DNAzuì后溶于100μl TE中,取20μl上樣。M表示全長的DNA,其余均為提取的樣品DNA。

根據(jù)您的關(guān)注的柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒,柱式細(xì)菌DNA提取試劑盒,BTN60802,百奧萊博,,,您可能還對以下產(chǎn)品有需求:

貨號 名稱 規(guī)格
BTN70903 一步法質(zhì)粒DNA提取試劑盒2.0 50次
BTN60801 柱式腐殖酸清除劑 30次
WE0400 口腔拭子DNA樣本保存管 200μl×20支
SY0002 溶菌酶 5g|10×5g
SY0006 核糖核酸酶A(100mg/ml) 1ml
QN0899 去內(nèi)毒素質(zhì)粒大量提取試劑盒 10T
QN0903 質(zhì)粒大量提取試劑盒 10T


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名稱:白細(xì)胞裂解液
貨號:BTN130989
規(guī)格:250mL
本品為即用型白細(xì)胞裂解溶液,可以用于裂解分離純化好的血液白細(xì)胞,用于DNA提取、RNA提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

儲存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:(以DNA提取為例)
1. 取新鮮抗凝血5mL,在10mL或15mL的塑料離心管中用紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞(紅細(xì)胞裂解液有幾種配方,用戶需要根據(jù)所選產(chǎn)品的使用手冊進(jìn)行操作,這里不列出每種的詳細(xì)步驟),也可以直接2500rpm離心5分鐘后取白細(xì)胞層到一新的10mL或15mL的塑料離心管中。
2.在所得的白細(xì)胞沉淀中或所得白細(xì)胞層溶液中加自備的生理鹽水使得白細(xì)胞的終體積為2mL。
3. 加1mL的本產(chǎn)品,混勻后55℃ 保溫3小時(shí),其間輕輕振搖數(shù)次。
4. 加入3mL自備的Tris飽和酚,輕輕震搖5分鐘,使得水相和酚相充分分開。
5. 3500rpm離心15分鐘,上層水相含DNA,中間白色層為蛋白質(zhì),下層為酚相。
6. 將非常粘稠的含DNA的上清液轉(zhuǎn)移到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。
7. 再用Tris飽和酚重復(fù)上面的抽提步驟,直到離心后中間層沒有白色的蛋白出現(xiàn)為止。
8.在上清液中加入等體積的自備的lǜ仿,輕輕震搖5分鐘,3500rpm離心5分鐘,轉(zhuǎn)移上清液到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。此步可以除去殘留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍體積的自備的3 M 乙酸鈉溶液(pH5.2)和2倍體積的無水乙醇,輕柔顛倒混勻,將出現(xiàn)絮狀的DNA沉淀。
10. 用移液槍頭將DNA沉淀挑取出來,轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中,用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中殘留的鹽離子。
11.轉(zhuǎn)移DNA沉淀到一個(gè)1.5mL的塑料離心管中,空氣中放置10分鐘左右待乙醇揮發(fā)后,加入0.5mL自備的TE緩沖液溶解DNA,4℃放置待用。

名稱:痰液采集器
貨號:BTN130938
規(guī)格:1個(gè)

名稱:植物DNA提取試劑盒
貨號:BTN3672
規(guī)格:50次
本試劑盒是根據(jù)經(jīng)典的方法改良得到的專門用于提取新鮮或冷凍植物組織基因組DNA(包括葉綠體DNA和線粒體DNA)的試劑盒。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 操作快速,整個(gè)過程在30分鐘內(nèi)即可完成。
2. 純度高,A260/A280在1.9左右,可直接用于PCR、酶切、雜交等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。提取得到的DNA大小在30-50Kb 之間。
3.產(chǎn)率高,高于大多數(shù)同類產(chǎn)品(尤其是基于離心柱的提取產(chǎn)品)。
4. 安全,本試劑盒對人體,無腐蝕性和刺激性氣味。

試劑盒組成:
成分 規(guī)格
溶液A 40ml
溶液B 20ml
RNase A溶液(10mg/mL) 0.75ml
說明書 1份


儲存條件:常溫運(yùn)輸及保存,RNase A溶液4℃保存,有效期一年。

使用方法:
注意:溶液A和溶液B容易產(chǎn)生沉淀,溶液B比較粘稠,用前均需要放置在65℃預(yù)熱使沉淀溶解、粘稠度降低,用前充分搖勻。

1. 65℃預(yù)熱溶液A,待其沉淀溶化后,充分混勻,取0.75mL 加入到10-15mL塑料離心管(常用于培養(yǎng)細(xì)菌用)中并放置于65℃待用。
2. 稱取植物組織0.1-0.3g左右,剪成微小的碎片,轉(zhuǎn)移到裝有溶液A的離心管中短暫勻漿。勻漿過程中將產(chǎn)生大量泡沫,屬于正常現(xiàn)象。也可以液氮研磨后將粉末加入到預(yù)熱的溶液A中(建議不要在陶器或玻璃研缽中破碎細(xì)胞,因?yàn)槠渲械闹饕煞侄趸钑翘禺惖匚紻NA,降低DNA 回收量。但可以在塑料研缽中研磨)。
3. 將勻漿液(包括植物碎片)全部轉(zhuǎn)移到新的1.5mL塑料離心管中。注意:勻漿液較為粘稠,可將1mL 槍頭剪去一截后用于轉(zhuǎn)移勻漿液,不能吸取的植物碎片可倒入。
4.在勻漿液中加入0.5倍體積 65℃預(yù)熱的溶液B,顛倒數(shù)次混勻。由于溶液B比較粘稠,可以將1mL 槍頭剪去一截再吸取。
5. 加入15μl的RNase A溶液(10mg/mL)。
6. 65℃放置3~5分鐘。如果室溫放置,DNA產(chǎn)量會降低10-20%。
7. 加入200μl自備lǜ仿,震蕩器上充分震蕩混勻30秒。
8. 12000~15000g室溫離心2分鐘,此時(shí)兩相交界面將有白色膜狀物,小心轉(zhuǎn)移上清液到一個(gè)新的1.5mL塑料離心管中,避免觸及中間層的白膜。
9. 加入1倍體積(約750μl)的自備的異丙醇到上清液中,蓋緊蓋子后用手上下顛倒30秒混勻。此時(shí)一般將有絮狀DNA沉淀出現(xiàn)。
10. 12000~15000g室溫離心3分鐘。此時(shí)管底將有微小DNA沉淀,小心棄上清,注意不要丟棄DNA沉淀。
11.在離心管中加1mL 75%乙醇,短暫震蕩,12000~15000g室溫離心3分鐘,棄上清。
12. 重復(fù)上述操作一次。
13. 短暫離心,小心吸棄殘留的液體(此步不要省略,否則殘留的液體含乙醇將會影響DNA電泳、酶切和PCR等反應(yīng)),室溫晾干。
14. 加入50-100μl自備的TE緩沖液充分溶解DNA沉淀。直接取5-10μl電泳檢測DNA,其余放冰箱備用。

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