動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試由專業(yè)試劑供應(yīng)商北京百奧萊博提供，用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試劑盒
英文名稱：Animal tissue/cell Mitochondrial DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：XH008
產(chǎn)品規(guī)格：50T|100T

本試劑盒用于從動(dòng)物細(xì)胞或組織中分離出完整而純化的線粒體。適合于動(dòng)物軟組織（肝或腦組織）和硬組織（肌肉）以及培養(yǎng)細(xì)胞線粒體DNA的提取制備。不適合植物及其他標(biāo)本的提取。

線粒體DNA提取的關(guān)鍵是盡可能的去掉核DNA。本試劑盒利用差速離心到比較純凈的線粒體，再利用DNA酶消化裂解緩沖系統(tǒng)等多步驟去掉核DNA，zuì后得到純凈的線粒體DNA。可用于PCR等對(duì)純度要求較高的實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組成：

組份	50T	100T
細(xì)胞裂解液	50mL	100 mL
線粒體清洗液	25 mL	50mL
DNA酶I	12mg	22mg
DNA酶反應(yīng)液	6ml	12ml
線粒體裂解液	10ml	20ml
蛋白沉淀液	7.5ml	15ml
核酸助沉劑	0.5ml	1ml
TE緩沖液	15ml	30ml

保存條件：2～8℃可保存一年。使用前，在DNA酶I中加入600μl（50T）或者1100μl（100T）的DNA酶反應(yīng)液，分裝后-20度保存。線粒體裂解液使用前常溫保存，如有沉淀可37度水浴溶解，不影響使用。

操作步驟：
準(zhǔn)備工作：在DNA酶I中加入600μl（50T）或者1100μl（100T）的DNA酶反應(yīng)液，適當(dāng)分裝后-20度保存。線粒體裂解液保存于常溫，如有沉淀37℃水浴溶解，離心機(jī)溫度下降到4℃（2～8℃），如無(wú)低溫離心機(jī)，也可以常溫離心，并將離心時(shí)間為10min的改為5min，但zuì后所得DNA品質(zhì)及產(chǎn)量可能會(huì)有一定影響。

1．樣本處理
a．組織勻漿：稱取100～200mg新鮮組織如肝臟、腦、心肌等，PBS或生理鹽水沖洗，洗凈血水，濾紙吸干，用剪刀剪為碎塊放入小容量玻璃勻漿器內(nèi)。加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨組織20次；
b．培養(yǎng)細(xì)胞勻漿：消化細(xì)胞，PBS洗滌，800×g 5～10min離心收集細(xì)胞。計(jì)數(shù)。每次提取需要5×10⁷個(gè)細(xì)胞，加入1.0 mL冰預(yù)冷的Lysis Buffer重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到小容量玻璃勻漿器內(nèi)，0℃冰浴研磨30~40次；
2．將組織或細(xì)胞勻漿物轉(zhuǎn)移到離心管，4℃，1000×g離心5min；
3．取上清，加入一新的離心管中，4℃，1000×g再次離心5min。
4．取上清，加入一新的離心管中，4℃，12,000×g離心10min。離心后的上清含胞漿成分，可從中提取胞漿蛋白。將上清轉(zhuǎn)移到新離心管，線粒體沉淀在管底；
5．在線粒體沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重懸線粒體沉淀，4℃，1000×g離心5min；
6．取上清，加入一新的離心管中，4℃，12,000×g離心10min。棄上清，高純度的線粒體沉淀在管底；
7．加入100μl DNA酶反應(yīng)液重懸線粒體，吹打均勻后，再加入10μl DNA酶I溶液（見(jiàn)準(zhǔn)備工作），混勻，37度水浴10min。此步為消化線粒體表面吸付的核DNA。4℃，12,000×g離心5min。盡可能的棄上清，再加入200μl TE重懸線粒體沉淀，離心，洗去殘留的DNA酶。
8．得到的沉淀，用100μl TE重懸線粒體沉淀。加入200μl線粒體裂解液，輕輕混勻（不可吹打），放置2min左右，不超過(guò)5min，再加入150μl蛋白沉淀液，迅速混勻。4℃，12,000×g離心5min。此步驟可進(jìn)一步去除核DNA。
9．取上清，加入一新的離心管中（可選用等體積的酚lǜ仿異戊醇25:24:1抽提一次，再用lǜ仿抽提一次，或者直接用lǜ仿抽提兩次，一般來(lái)說(shuō)，此步可省，并不影響后續(xù)的PCR），加入0.6倍體積的異丙醇（如無(wú)異丙醇，可加入2.5倍體積的乙醇沉淀DNA）及10μl核酸核酸助沉劑，混勻，-20℃沉淀半小時(shí)左右（此步可省），4℃，12,000×g離心10min。
10．棄上清，再加入1ml 70%乙醇，4℃，12,000×g離心10min。重復(fù)用70%乙醇洗一次。
11．棄上清后再次離心1min吸棄上清，開(kāi)蓋涼干約5-10分鐘。
12．加入20-30μl TE緩沖液,輕彈管底，37度水浴5分鐘，線粒體DNA溶解。
13．進(jìn)行DNA電泳檢測(cè)及-20度保存，進(jìn)行下步的實(shí)驗(yàn)。

注意事項(xiàng)：
1．為保證獲得完整及盡可能多的線粒體，勻漿條件要示：是全程低溫操作。第二是快速。第三，如用條件可將勻漿后的碎片在顯微鏡下觀察。與組織塊相比，培養(yǎng)細(xì)胞特別是貼壁培養(yǎng)細(xì)胞在用玻璃勻漿器勻漿時(shí)較難破壁，因而要選用小容量玻璃勻漿器、間隙嚴(yán)密的研杵上下研磨培養(yǎng)細(xì)胞。
2．線粒體DNA本身含量很低，如果電泳檢測(cè)不到，可加大上樣量，用更少量的TE溶解沉淀，或者直接進(jìn)入PCR檢測(cè)。
3．以離心力g計(jì)算正確的離心速度，不同的離心機(jī)可據(jù)此計(jì)算離心速度。

一般低溫度心機(jī)都有離心力顯示，如果沒(méi)有，可以用以下公式簡(jiǎn)單的換算。
  G＝1.11×(10^-5)×R×[rpm]²
G為離心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍數(shù)來(lái)表示；[rpm]²即：轉(zhuǎn)速的平方；R為半徑，單位為厘米。

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貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN90315	非凍型尿液DNA保存液	100mL
BTN60910	非凍型血液DNA保存液	250mL
BTN60403	紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化)	250mL
BTN80801	柱式拭子DNA提取試劑盒	50次
BTN51203	非酶RNA清除劑1.0	1.5mL
BTN60607	液相內(nèi)毒素清除劑	100次
WE0185	血塊基因組DNA提取試劑盒	50次

關(guān)注動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試劑盒，動(dòng)物組織/細(xì)胞線粒體DNA提取試劑盒，XH008，百奧萊博，，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：



名稱：紅細(xì)胞裂解液A型(核酸純化)
貨號(hào)：BTN60403
規(guī)格：250mL
本品用于快速裂解哺乳動(dòng)物全血中的紅細(xì)胞而基本不破壞白細(xì)胞和其他淋巴細(xì)胞的完整性。由于紅細(xì)胞是血液的主要細(xì)胞成份，不含DNA和RNA，其所含血紅素能抑制PCR反應(yīng)，所以先用本產(chǎn)品裂解紅細(xì)胞，再提取基因組DNA或RNA 有助于提高所得樣品純度。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.快速，一次處理只需要2-3分鐘。處理后提取血液DNA可以不需要酚/lǜ仿去蛋白質(zhì)。
2.，一次處理能裂解80%以上的哺乳動(dòng)物紅細(xì)胞，一般樣品zuì多只需要處理兩次。
3.擴(kuò)容性好，可以一次處理多達(dá)幾十毫升的樣品，也可以處理100μL的血液。
4. 兼容性好，可以與市場(chǎng)上大多數(shù)血液DNA提取試劑盒結(jié)合使用。

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在裝有抗凝血液的離心管中，按1:1的比例加入紅細(xì)胞裂解液A型并輕柔顛倒混勻。
2. 5000-10000 g室溫離心2分鐘，小心吸棄棄上清。
3. 將細(xì)胞沉淀重懸于1/2 體積的紅細(xì)胞裂解液A型中，輕柔吹打混勻后5000-10000g室溫離心2分鐘。
4.沉淀即為去除了紅細(xì)胞的血液細(xì)胞，可以直接用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

名稱：一步離心式石蠟清除劑
貨號(hào)：BTN70302
規(guī)格：100次
用石蠟包埋組織作為材料進(jìn)行PCR的難題之一是如何有效去除石蠟，因?yàn)闅埩舻氖灢坏珪?huì)影響DNA提取，還會(huì)干擾PCR擴(kuò)增。常規(guī)的脫蠟方法一般需要1-2小時(shí)的時(shí)間，需要多次離心，每次離心都會(huì)造成樣品的丟失。本產(chǎn)品只需要一步離心，克服了常規(guī)方法的缺點(diǎn)。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.快速簡(jiǎn)單，只需要離心一次，免去了反復(fù)換液和離心，減少了樣品的丟失。
2. 脫蠟效果好，跟經(jīng)典的二甲苯/乙醇法相當(dāng)。
3. 即開(kāi)即用，客戶自己不需要準(zhǔn)備額外的試劑。

產(chǎn)品組成：

成分	規(guī)格
溶液A	100mL
溶液B	7.5ml
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 將1mL溶液A加入到1.5mL塑料離心管中。
2. 放入一片不超過(guò)25μm的石蠟包埋組織切片。
3.以zuì大速度振蕩10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振蕩10秒混合。
6. 7000 g離心2分鐘，小心吸棄上清。
7.真空抽干機(jī)抽干離心管中殘留的液體。此步驟約需要一小時(shí)。
8. 得到的石蠟包埋組織切片即可用于DNA提取。

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