石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購(gòu)。...

特別提示：包括石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒（特殊脫蠟方式)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：石蠟包埋組織DNA快速提取試劑盒（特殊脫蠟方式)
英文名稱：DNA rapid extraction kit from Paraffin-embedded tissue
產(chǎn)品貨號(hào)：WH0016
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒采用特殊的脫蠟方式和裂解條件釋放組織切片中的DNA，從zuì大程度上減少了因福爾馬林交聯(lián)對(duì)DNA的損傷。此外，采用可以特異性結(jié)合DNA的離心吸附柱和獨(dú)特的緩沖液系統(tǒng)進(jìn)行FFPE DNA提取。整個(gè)過(guò)程不涉及有機(jī)試劑二甲苯，安全可行、簡(jiǎn)單快速；提取的基因組完整性好，純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠。使用本試劑盒提取的FFPE DNA可適用于多種下游應(yīng)用，如PCR和real-time PCR；SNP基因分析和STR基因分析；藥物基因組學(xué)研究等。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
·方便快捷：整個(gè)操作過(guò)程在1小時(shí)內(nèi)完成。
·安全可行：不涉及二甲苯等有機(jī)試劑，無(wú)害。
·經(jīng)濟(jì)：無(wú)需蛋白酶K消化，獨(dú)特的裂解液和特異的吸附柱提取高純度的DNA。

試劑盒組成：

組分	50T
裂解液GL	30ml
緩沖液GP	3 ml
緩沖液GD	13 ml
漂洗液PW	15 ml
洗脫緩沖液TE	15 ml
RNase-Free吸附柱CR2	50個(gè)
收集管（2 ml)	50個(gè)

保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個(gè)月，更長(zhǎng)時(shí)間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產(chǎn)生沉淀，使用前應(yīng)將試劑盒內(nèi)的溶液在室溫放置一段時(shí)間，必要時(shí)可在37℃水浴中預(yù)熱10min，以溶解沉淀。

注意事項(xiàng)：（請(qǐng)務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng))
1．拿到樣品后要盡快在4-10%的福爾馬林中固定，固定時(shí)間以8-24小時(shí)為宜，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致基因組斷裂，影響下游實(shí)驗(yàn)。
2．確保包埋前的樣品徹底脫水，殘留的福爾馬林會(huì)抑制PCR檢測(cè)酶的作用。
3．本產(chǎn)品適用于醫(yī)學(xué)、科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。
4．本產(chǎn)品所提DNA的完整性依賴于樣本類型、儲(chǔ)存時(shí)間以及固定條件。如果甲醛固定時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或樣本存放時(shí)間過(guò)久（＞1年）則易導(dǎo)致DNA完整性受損，無(wú)法擴(kuò)出長(zhǎng)片段。
5．若裂解液GL、緩沖液GD中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，搖勻后使用。
6．試劑盒中各試劑在使用前應(yīng)按照說(shuō)明書要求操作。
7．DNA含量低的石蠟包埋組織樣本推薦使用T我司W(wǎng)H0015石蠟包埋組織DNA提取試劑盒進(jìn)行提取。

使用方法：
次使用前應(yīng)按照試劑瓶標(biāo)簽的說(shuō)明在GD和PW中加入無(wú)水乙醇!所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1．樣本處理
  a.石蠟切片：取石蠟切片（5-10μm厚，1×1cm2大?。?-8張。
  b.石蠟塊：手術(shù)刀刮取約30mg的組織樣本（盡量去除多余的石蠟）。
  注意：如果樣品表面暴露于空氣中，zuì初刮取的2~3片棄掉不用。
  c.福爾馬林等固定液中的樣本：取30mg樣本，用手術(shù)刀切為數(shù)塊,置于1.5 ml離心管中,加入500μl PBS （10mM，pH7.4)渦旋振蕩混勻12000rpm（~13400×g )室溫離心1 min,棄上清，重復(fù)3次。
2．將樣本裝于1.5 ml無(wú)菌離心管中，加入500μl裂解液GL，再加入50 μl緩沖液GP，劇烈渦旋10 sec。
3．98℃孵育30 min，期間顛倒混勻3次，直至樣品完全溶解。
  注意：水浴請(qǐng)用長(zhǎng)鑷子操作。
4．12000rpm（~13400×g )室溫離心5 min。
5．使用200 μl槍頭沿管壁小心吸取中間層的水相清液于新的離心管中（上層是石蠟及蛋白混合物，下層為少許雜質(zhì)沉淀，如果分層不徹底可以延長(zhǎng)離心時(shí)間，直到上層混合物和水相清液很好的分開）。
6．（可選步驟）如果要去除RNA，可以將樣品中加入2 μl RNase A（100 mg/ml），室溫孵育2 min后，進(jìn)行下一步操作。
7．加入2倍體積的無(wú)水乙醇（例：450 μl水相清液加入900 μl無(wú)水乙醇），充分混勻，靜置3min。
8．將上一步所得的混合液加入一個(gè)吸附柱CR2中，8000rpm（~6,000×g )室溫離心2 min，倒掉收集管中的廢液，重新將吸附柱放回收集管中。
  注意：吸附柱zuì大容量為700 μl，可將剩余液體重復(fù)上述步驟上柱。
9．向吸附柱CR2中加入500μl緩沖液GD，8000rpm（~6,000×g )室溫離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
10．向吸附柱CR2中加入600 μl漂洗液PW 8000rpm（~6,000×g )室溫離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱放回收集管中。
11．重復(fù)操作步驟10。
12．將吸附柱CR2放回收集管中，12000rpm（~13400×g )，離心2 min，倒掉廢液。將吸附柱開蓋置于室溫放置2-5 min，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
  注意：乙醇?xì)埩魰?huì)抑制后續(xù)的酶反應(yīng)，所以晾干時(shí)要確保乙醇揮發(fā)干凈。但也不要干燥太長(zhǎng)時(shí)間，以免難以洗脫DNA。
13．將吸附柱CR2轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加65℃預(yù)熱的30-100 μl洗脫緩沖液TE或ddH2O洗脫，室溫放置2-5min，12000rpm （~13400×g)離心2 min，將收集有DNA的離心管-20℃保存。
  注意：洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于30 μl，體積過(guò)小影響回收效率。為增加基因組DNA的得率，可將離心得到的溶液再加入吸附柱CR2中，室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g )離心2 min。洗脫液的pH對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用ddH2O做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃，以防DNA降解。

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