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產(chǎn)品詳情

SY0007 核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)

  • 產(chǎn)品/服務(wù):SY0007 核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)
  • 型 號(hào):SY0007
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價(jià):面議 
  • 更新日期:2023-05-09
  • 有效期至:長(zhǎng)期有效
  • 瀏覽次數(shù):1125
產(chǎn)品簡(jiǎn)介

北京百奧萊博供應(yīng)的核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)用于科學(xué)研究,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價(jià)格,深為用戶(hù)稱(chēng)道,了解更多核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)等DNA提取純化產(chǎn)品請(qǐng)聯(lián)系我司咨詢(xún)訂購(gòu)。...

產(chǎn)品詳細(xì)介紹

特別提示:包括核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!


產(chǎn)品名稱(chēng):核糖核酸酶A(來(lái)源于牛胰腺)
英文名稱(chēng):Ribonuclease A (RNase A) from bovine pancreas
產(chǎn)品貨號(hào):SY0007
產(chǎn)品規(guī)格:100mg|1g

核糖核酸酶A(Ribonuclease A,常用縮寫(xiě)RNase A),一種含4個(gè)二硫鍵的單鏈多肽,分子量約為13.7kDa(氨基酸序列)。作為一種核糖核酸內(nèi)切酶(endoribonuclease),特異性降解單鏈RNA上的胞嘧啶(C)或尿嘧啶(U)殘基。具體來(lái)說(shuō),切割識(shí)別的是由某核苷酸上的5’-核糖和相鄰的嘧啶類(lèi)核苷酸3’-核糖上磷酸基團(tuán)形成的磷酸二酯鍵,從而使得2’, 3’-環(huán)磷酸水解為對(duì)應(yīng)的3’-核苷磷酸(比如,pG-pG-pC-pA-pG經(jīng)RNase A切割產(chǎn)生pG-pG-pCp 和A-PG)。RNase A切割單鏈RNA活性zuì高,推薦工作濃度為1-100μg/ml,兼容于各種反應(yīng)體系。低鹽濃度(0-100mM NaCl),可用來(lái)切割單鏈RNA,雙鏈RNA,以及RNA-DNA雜交形成的RNA鏈。然而,高鹽濃度(≥0.3M),RNase A僅特異性切割單鏈RNA。

核糖核酸酶A(RNase A)zuì常見(jiàn)的應(yīng)用在于質(zhì)粒DNA或基因組DNA制備過(guò)程中去除RNA,此制備過(guò)程中DNase酶活性的存在與否是需要重視的污染之一,可采用水浴煮沸這種傳統(tǒng)方法來(lái)滅活DNase活性。另外,本品還可用于RNA酶保護(hù)分析、RNA序列分析等分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。

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名稱(chēng):白細(xì)胞裂解液
貨號(hào):BTN130989
規(guī)格:250mL
本品為即用型白細(xì)胞裂解溶液,可以用于裂解分離純化好的血液白細(xì)胞,用于DNA提取、RNA提取等后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

儲(chǔ)存條件:低溫運(yùn)輸,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:(以DNA提取為例)
1. 取新鮮抗凝血5mL,在10mL或15mL的塑料離心管中用紅細(xì)胞裂解液裂解紅細(xì)胞(紅細(xì)胞裂解液有幾種配方,用戶(hù)需要根據(jù)所選產(chǎn)品的使用手冊(cè)進(jìn)行操作,這里不列出每種的詳細(xì)步驟),也可以直接2500rpm離心5分鐘后取白細(xì)胞層到一新的10mL或15mL的塑料離心管中。
2.在所得的白細(xì)胞沉淀中或所得白細(xì)胞層溶液中加自備的生理鹽水使得白細(xì)胞的終體積為2mL。
3. 加1mL的本產(chǎn)品,混勻后55℃ 保溫3小時(shí),其間輕輕振搖數(shù)次。
4. 加入3mL自備的Tris飽和酚,輕輕震搖5分鐘,使得水相和酚相充分分開(kāi)。
5. 3500rpm離心15分鐘,上層水相含DNA,中間白色層為蛋白質(zhì),下層為酚相。
6. 將非常粘稠的含DNA的上清液轉(zhuǎn)移到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。
7. 再用Tris飽和酚重復(fù)上面的抽提步驟,直到離心后中間層沒(méi)有白色的蛋白出現(xiàn)為止。
8.在上清液中加入等體積的自備的氯f(wàn)ǎng,輕輕震搖5分鐘,3500rpm離心5分鐘,轉(zhuǎn)移上清液到一干凈的10mL或15mL的塑料離心管中。此步可以除去殘留的酚。
9.在上清液中加入0.1倍體積的自備的3 M 乙酸鈉溶液(pH5.2)和2倍體積的無(wú)水乙醇,輕柔顛倒混勻,將出現(xiàn)絮狀的DNA沉淀。
10. 用移液槍頭將DNA沉淀挑取出來(lái),轉(zhuǎn)移到1.5mL的塑料離心管中,用75%的乙醇浸泡2次。此操作可以去除DNA中殘留的鹽離子。
11.轉(zhuǎn)移DNA沉淀到一個(gè)1.5mL的塑料離心管中,空氣中放置10分鐘左右待乙醇揮發(fā)后,加入0.5mL自備的TE緩沖液溶解DNA,4℃放置待用。

名稱(chēng):柱式真菌DNA提取試劑盒(玻璃珠法)
貨號(hào):BTN100303
規(guī)格:50次
真菌DNA提取是一個(gè)難題,一是因?yàn)檎婢芯z體、孢子等多種完全不同的結(jié)構(gòu)形態(tài),二是因?yàn)槠浼?xì)胞壁一般都很厚,比較難以破碎。本產(chǎn)品是液氮研磨法柱式真菌DNA提取試劑盒的姊妹產(chǎn)品,它利用玻璃珠法破碎細(xì)胞,主要用于從真菌孢子和液體培養(yǎng)的真菌細(xì)胞中提取DNA(液氮研磨法柱式真菌DNA提取試劑盒采用液氮研磨法破碎細(xì)胞,適用于從真菌菌絲體中提取其基因組DNA)。

產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,提供包括玻璃珠、離心吸附柱在內(nèi)的所有試劑和耗材。
2. 采用玻璃珠法破碎細(xì)胞,屬于物理方法,遠(yuǎn)比基于蝸牛酶或破壁酶的溫和化學(xué)破壁法重復(fù)性好,也不容易帶入外援真菌DNA。
3. 本方法提取一個(gè)樣品只需要10余分鐘,方便、快速和。
4.一次可以處理5mL的過(guò)夜真菌培養(yǎng)物,所得的基因組DNA OD260/OD280一般都在1.8左右,長(zhǎng)度一般在20 kb左右,每mL菌液的DNA產(chǎn)率一般在1-3ug??梢灾苯佑糜赑CR和酶切等后續(xù)試驗(yàn)。

試劑盒組成:
成成分 規(guī)格
溶液A 25ml
溶液B 25ml
溶液C 75ml
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50ml
DNA洗脫液2.0 10ml
酸洗玻璃珠,400μm 25g
說(shuō)明書(shū) 1份


儲(chǔ)存條件:常溫運(yùn)輸及保存,保存期為一年。

使用方法:
1. 對(duì)菌液:取3-5mL過(guò)夜培養(yǎng)的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干凈的塑料離心管中,12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
2. 對(duì)菌落:用接種針在在培養(yǎng)基上刮取盡可能多的真菌菌落(約50mg),轉(zhuǎn)移到裝有1mL水的干凈的塑料離心管中,洗滌下接種環(huán)上的菌體。12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
3. 對(duì)孢子材料,一般取0.1g左右,直接加入到離心管中,然后進(jìn)入下一步操作。
4.在材料中加入無(wú)菌水1mL,振蕩半分鐘后12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
5.沉淀中加入500μl溶液A和0.5克的玻璃珠,渦旋震蕩10分鐘。
6. 加入500μL的溶液B,渦旋震蕩3分鐘,12000rpm離心2分鐘,將上清液全部轉(zhuǎn)移到一個(gè)5mL的干凈的塑料離心管中?;蛘呙抗?.3mL,分別轉(zhuǎn)移到2-3個(gè)1.5mL的干凈的塑料離心管中。
7.在上清中加入3倍體積的溶液C,顛倒數(shù)次混勻后,分三次上離心吸附柱,每次上柱后均先室溫放置2分鐘,然后12000rpm離心1分鐘,倒掉穿透液,再第二次上柱,重復(fù)上面的操作,直到掛柱步驟完成。
8.在離心吸附柱中加入500μl通用洗柱液,12000rpm離心1分鐘,倒掉穿透液。
9. 重復(fù)上步操作一次。
10. 12000rpm空柱離心1分鐘。
11. 加入50-100μl DNA洗脫液2.0,室溫放置1分鐘以上,12000rpm離心1分鐘,穿透液即為真菌DNA樣品。
12. 為了得到更多的DNA樣品,可以重復(fù)上步操作1-2次。
13. 所得DNA即可立即使用或放冰箱長(zhǎng)期保存。

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聯(lián)系人:王欣

電話(huà):18518407031

手機(jī):18518407031(微信同步)

地址:北京市海淀區(qū)紫雀路33號(hào)院3號(hào)樓

 
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