柱式質(zhì)粒DNA提取試劑盒是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品僅用于生物化學研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多柱式質(zhì)粒DNA提取試劑盒等DNA提取純化產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括柱式質(zhì)粒DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：柱式質(zhì)粒DNA提取試劑盒
英文名稱：Plasmid DNA column extraction kit
產(chǎn)品貨號：BTN60205
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本試劑盒是用于質(zhì)粒DNA小量制備與純化的試劑盒。菌體先經(jīng)堿裂解法處理，再通過離心吸附柱，專一結(jié)合DNA，zuì后洗去雜質(zhì)，快速提取質(zhì)粒DNA，全套操作可以在30分鐘之內(nèi)完成。使用本試劑盒可從1-5mL過夜培養(yǎng)的菌液純化得到高達20μg的高純度質(zhì)粒DNA(OD260/OD280 = 1.8-2.0)，可以直接用于酶切、轉(zhuǎn)化、測序及PCR等。

試劑盒特點：
1.快速、步驟少，整個操作在半個小時之內(nèi)完成。
2. 不需要預(yù)平衡離心吸附柱。
3. 洗柱液即開即用，不需要額外加乙醇。
4. 純度高，采用本試劑盒提取的質(zhì)粒OD 比值在1.8-2.0 之間。
5.產(chǎn)量高，每毫升過夜培養(yǎng)的細菌可以提取到2-5μg/mL。
6. 用途廣，適用于低拷貝和高拷貝質(zhì)粒。
7. 價格低，比多數(shù)同類產(chǎn)品的價格更。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	13ml
溶液B	13ml
溶液C	18ml
RNase A溶液(10mg/mL)	0.15ml
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液2.0	10ml
離心吸附柱，6層	50只
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸和保存，RNase A 需要-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 先將全部RNase A溶液全部加入到溶液A中，搖勻后再取用，未用完的溶液Azuì好在4℃保存。
2.從篩選平板上挑取單菌落至含抗生素的培養(yǎng)基中，37℃震蕩培養(yǎng)12-16小時(搖床轉(zhuǎn)速200-300)。注意：建議使用LB培養(yǎng)基，營養(yǎng)更豐富的培養(yǎng)基會使菌體濃度過高，超過純化系統(tǒng)處理能力而降低DNA 質(zhì)量。另外，延長培養(yǎng)時間有利于提高質(zhì)粒DNA濃度，但是菌液培養(yǎng)過長時間會因細胞死亡、裂解而造成質(zhì)粒DNA濃度降低。
3. 用1.5mL離心管收集1-4mL 過夜培養(yǎng)飽和菌液，室溫12000rpm離心1分鐘，棄上清，再短暫離心，吸棄殘留液體。
4. 加入250μL溶液A，用槍頭充分吹打使菌體重懸(此步在冰上操作效果更佳)。
 注意：細胞未充分懸浮會影響后續(xù)操作，可以使用漩渦振蕩器幫助混勻或使用Tip 吸頭吹打沉淀至完全混勻。
5. 加入250μL溶液B(如果溶液B有沉淀，用前須37℃加熱溶解后冷卻到室溫方可使用)，溫和反復(fù)顛倒混勻4-6次，看到溶液變粘即可，然后冰上放置不超過4-5分鐘。注意：此步處理不能超過5分鐘，否則DNA的堿損傷比較嚴重。同時千萬不要劇烈振蕩，否則基因組DNA 斷裂產(chǎn)生的片段非常容易污染質(zhì)粒DNA。溶液B用后需要將蓋擰緊存放，否則空氣中的二氧化碳會進入溶液，形成碳酸，中和溶液B中的NaOH，降低其效率)。
6. 加入350μL 冰上預(yù)冷的溶液C，反復(fù)顛倒混勻4-6次，可見白色沉淀物產(chǎn)生，然后冰上放置至少5分鐘。
7. zuì高轉(zhuǎn)速(12000rpm以上)4℃離心5分鐘，小心將上清液轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中。由于此時的溶液比重較大，有時候出現(xiàn)沉淀漂浮是正?，F(xiàn)象，取上清時避開漂浮的沉淀即可。如果此步的離心在室溫進行，更容易出現(xiàn)沉淀物漂浮的現(xiàn)象。
8. 靜置2分鐘以讓質(zhì)粒DNA與吸附柱充分結(jié)合，此步十分重要。
9.室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中的廢液。
10. 加入500μL的通用洗柱液，室溫12000rpm離心1分鐘，棄收集管中廢液。
 注意：通用洗柱液中含乙醇，用后需要將蓋擰緊存放，否則乙醇會揮發(fā)。
11. 重復(fù)上步1次。
12.室溫12000rpm離心1分鐘，甩干殘留液體。此步不能省略，否則殘留乙醇會影響DNA的后續(xù)使用(如DNA上樣時不能沉淀到加樣孔中)。
13. 將離心吸附柱置于一個新的1.5mL塑料離心管(自備)中，加入30-100μL65-80℃預(yù)熱的DNA 洗脫液2.0，室溫放置2分鐘。常溫的DNA 洗脫液2.0也可以用于洗脫，但產(chǎn)量稍微有所降低。
14.室溫12000rpm離心1分鐘，離心管底溶液即質(zhì)粒DNA。
15. 由于百奧萊博的吸附柱結(jié)合DNA 能力較強，如果再加適量DNA 洗脫液2.0 到離心吸附柱中，往往還能洗脫下很多質(zhì)粒DNA(相當于次洗脫的20-30%)，但注意不要使用上步得到的DNA洗脫液2.0來洗脫。

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貨號	名稱	規(guī)格
BTN60403	紅細胞裂解液A型(核酸純化)	250mL
BTN81107	無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA大量提取試劑盒	5次
WE0403	尿液DNA樣本保存管	20套
ALH088	柱式質(zhì)粒大量提取試劑盒	10次
SY0003	溶壁酶(10U/μl)	1500U|3000U|10000U
QN0890	真菌基因組DNA提取試劑盒	50T|100T
QN0896	植物基因組DNA提取試劑盒	50T|100T

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名稱：非凍型尿液DNA保存液
貨號：BTN90315
規(guī)格：100mL
本品在室溫條件下長期保存用于DNA提取的尿液樣品保存液。它能夠、長期保證DNA分子的完整性。

產(chǎn)品特點：
1. 保存時間長，可室溫保存尿液DNA長達六個月，尤其適合于野外尿液樣品采集。
2. DNA完整性好，純化后長度在20-50 Kb之間。
3. DNA無化學修飾，提得的DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學實驗。
4. 能防止尿液在4℃結(jié)晶。
5. 安全可靠，本產(chǎn)品無害。
6. 使用簡單，直接把新鮮的尿液樣品與本產(chǎn)品混合即可。

儲存條件：室溫運輸及保存，有效期兩年。

使用方法：(以DNA提取為例)
1. 迅速將尿液與本產(chǎn)品按10:1的比例混合。
2. 常溫閉光保存直到使用。
3. 使用常規(guī)液體DNA提取方法提取DNA即可。推薦使用柱式尿液DNA提取試劑盒(BTN90314)，使用柱式尿液DNA提取試劑盒提取本產(chǎn)品保存的尿樣，兼容性好，提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、電泳、Southern雜交和PCR等分子生物學實驗。

名稱：柱式真菌DNA大量提取試劑盒(玻璃珠法)
貨號：BTN80926
規(guī)格：4次
本試劑盒在柱式真菌DNA提取試劑盒(BTN70901)基礎(chǔ)上改良而得大提升級產(chǎn)品，主要用于大量快速從各種真菌材料中提取基因組DNA。

產(chǎn)品特點：
1.處理量大，一次可以處理1-3g 各種真菌組織。
2. 純度高，OD260/280一般在1.8以上。不含污染和抑制劑，得到的DNA可以不經(jīng)稀釋直接用于酶切、PCR、real-timePCR、multiplex PCR、RAPD、RELP、AFLP、Southern Blotting，microsatellite analysis等各種后續(xù)分子生物學實驗。
3. 采用玻璃珠法破碎細胞，屬于物理方法，遠比基于蝸牛酶或破壁酶的溫和化學破壁法重復(fù)性好，也不容易帶入外援真菌DNA。
4.產(chǎn)率一般在10-100μg/g真菌樣品。離心吸附柱zuì大吸附量為800μg。
5. DNA片段長度一般在20-40kb左右。
6.適用范圍廣，適用于度大多數(shù)真菌材料，包括酵母(S.cerevisiae、S.pomb、Pichia pastoris)等。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	40ml
溶液B	40ml
溶液C	100ml
大提離心吸附柱	4套
通用洗柱液	200ml
DNA洗脫液2.0	5ml
酸洗玻璃珠，400μm	40g
說明書	1份

儲存條件：常溫運輸,4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 對菌液：取60-100mL 過夜培養(yǎng)的真菌菌液(OD600一般在1以上)到干凈的塑料離心管中，12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
2. 對菌落：用接種針在在培養(yǎng)基上刮取盡可能多的真菌菌落(約1 g)，轉(zhuǎn)移到裝有20mL 無菌水的干凈的塑料離心管中，洗滌下接種環(huán)上的菌體。12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
3. 對孢子材料，一般取1-3g左右，直接加入到離心管中，在材料中加入無菌水20mL，振蕩半分鐘后12000rpm離心2分鐘棄上清留沉淀。
4.沉淀中加入10mL溶液A和10 克的玻璃珠，渦旋震蕩10分鐘，可以延長震蕩時間。
5. 加入10mL的溶液B，渦旋震蕩5分鐘，12000rpm離心2分鐘，將上清液全部轉(zhuǎn)移到一個50mL的干凈的塑料離心管中。
6.在上清中加入3倍體積的溶液C，顛倒數(shù)次混勻后，分三次上離心吸附柱，每次上柱后均先室溫放置2分鐘，然后12000rpm離心1分鐘，倒掉穿透液，再第二次上柱，重復(fù)上面的操作，直到掛柱步驟完成。
7. 將20mL 通用洗柱液加入離心柱，12000rpm離心1分鐘，棄穿透液。
8. 重復(fù)上步操作一次。
9. 12000rpm 空甩1分鐘去除殘留液體。
10. 將離心柱放置在一新的50mL塑料離心管中，加入500μL DNA 洗脫液2.0。
11.室溫放置5分鐘后12000rpm離心1分鐘，管底即為真菌DNA樣品，吸取離心管中的DNA溶液重新滴加在吸附柱上，離心洗脫以收集更多的DNA。
12. 所得DNA可立即使用，也可長期保存在－20℃。
13. 注：如離心機轉(zhuǎn)速不能達到12000rpm，可以用zuì大轉(zhuǎn)速離心10-15min 代替12000rpm離心1-2min。

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