土壤基因組DNA提取試劑盒是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，土壤基因組DNA提取試劑盒是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括土壤基因組DNA提取試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：土壤基因組DNA提取試劑盒
英文名稱：Soil genomic DNA Extraction Kit
產(chǎn)品貨號(hào)：RFT036
產(chǎn)品規(guī)格：50次

本公司的土壤DNA提取試劑盒采用獨(dú)特的腐殖酸去除液(緩沖液R2)能夠有效去除腐殖酸；吸附柱CG能能有效去除金屬等抑制因子，提純得到的基因組DNA可直接用于PCR 反應(yīng)，酶切或定量實(shí)驗(yàn)。

試劑盒組份：

試劑盒組成	50次	貯存方式
緩沖液R1	40 ml	常溫
緩沖液R2	6 ml	常溫
緩沖液R3	6 ml	常溫
緩沖液R4	10 ml	常溫
緩沖液 R5	20 ml	常溫
漂洗緩沖液WB1	30 ml	常溫
漂洗緩沖液WB2 (濃縮液)	13 ml	室溫
洗脫緩沖液EB	15 ml	室溫
Glass beads	20 g	常溫
吸附柱CG	50個(gè)	室溫
收集管(2 ml)	50個(gè)	室溫
說明書	1份

準(zhǔn)備工作：
1. 準(zhǔn)備55℃，70℃水浴；無水乙醇；異丙醇；制冰機(jī)；1.5ml離心管；2ml離心管
2. 按照標(biāo)簽所示在漂洗緩沖液WB2中加入無水乙醇，混勻后蓋緊瓶蓋后室溫貯存?zhèn)溆谩?br /> 3. 每次使用前請(qǐng)檢查緩沖液R2，緩沖液R3是否有沉淀生成，如果出現(xiàn)沉淀，37℃溫浴至沉淀溶解后再使用。

標(biāo)準(zhǔn)操作步驟：
如非指出，所有離心步驟均為使用臺(tái)式離心機(jī)在室溫下離心。

1、稱0.3-0.5 g土壤置于2ml離心管中，加入0.4 g Glass Beads，再加入780μl 緩沖液R1與100μl 緩沖液R2。渦旋器高速震蕩3-5min。
注：對(duì)含水量豐富的樣品，可以預(yù)先離心除去部分水分后再稱取樣品。緩沖液R2是腐殖酸去除劑，100μl對(duì)大部分樣品來說足以有效除去腐殖酸等抑制因子。對(duì)一些腐殖酸含量特別豐富的土壤， 緩沖液R2的量可以適當(dāng)增加，但不能超過250μl，否則會(huì)嚴(yán)重影響DNA的得率。
2、加入200μl 緩沖液R3(R3如有沉淀37℃水浴完全溶解后再用)，渦旋混勻。 70℃水浴處理10min。期間振蕩幾次。
注：如果要純化革蘭氏陽性菌的DNA，請(qǐng)?jiān)?0℃處理完后，再90℃水浴處理2min。
3、12000 rpm(~13000g)離心1分鐘，取600μl上清到1.5ml離心管中，加入180μl 緩沖液R4混勻。
注：轉(zhuǎn)移上清時(shí)確保不要吸取到沉淀，轉(zhuǎn)移的上清量zuì好不超過80%。
4、冰上放置5分鐘。12000 rpm(~13000g)離心1分鐘。 轉(zhuǎn)移上清到新的1.5ml離心管中。
注：轉(zhuǎn)移上清時(shí)確保不要吸取到沉淀，轉(zhuǎn)移的上清量zuì好不超過80%。
5、加入0.7倍上清體積的異丙醇顛倒混勻。12000 rpm(~13000g)離心2分鐘。小心地倒掉上清。
注：如果樣品中DNA含量很低，加入異丙醇混勻后-20℃放置1小時(shí)。
6、加入350μl 緩沖液R5，待沉淀完全溶解后加入300μl無水乙醇，混勻。
注：為加速溶解沉淀，可置樣品于55℃水浴中。
7、將上步混合液轉(zhuǎn)移到吸附柱CG中(吸附柱放入收集管中)，12000rpm離心30秒，倒掉濾過液。
8、向吸附柱CG中加入500μl 漂洗緩沖液WB1，12,000 rpm (~13,000×g ) 離心30 秒，倒掉廢液。
9、向吸附柱CG中加入600μl 漂洗緩沖液WB2(使用前請(qǐng)先檢查是否已加入無水乙醇)，12,000 rpm (~13000g) 離心30 秒，倒掉廢液，吸附柱CG放入收集管中。
10、向吸附柱CG中加入600μl漂洗緩沖液WB2，12,000 rpm (~13000g) 離心30秒，倒掉廢液，將吸附柱CG放入收集管中。
11、12,000 rpm(~13000g)離心2分鐘，以徹底晾干吸附材料中殘余的漂洗液。
注：此步驟非常重要，其目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)(酶切、PCR等)實(shí)驗(yàn)。
12、將吸附柱CG轉(zhuǎn)入一個(gè)干凈的1.5ml離心管中，向吸附膜的中間部位懸空滴加50–100μl經(jīng)70℃水浴預(yù)熱的洗脫緩沖液EB，室溫放置2分鐘，12,000 rpm(~13000g)離心2分鐘。
注意：
a.洗脫緩沖液體積zuì好不少于50μl，體積過小影響回收效率。
b.洗脫液的pH值對(duì)于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率。
13、DNA產(chǎn)物-20℃保存。

大量操作步驟(針對(duì)含微量核酸的樣品)
1、稱1-5g土壤置于10ml離心管中，加入1g Glass Beads，再加入3ml 緩沖液R1與200μl 緩沖液R2。渦旋器高速震蕩3-5分鐘。
2、加入600μl 緩沖液R3，渦旋混勻。70℃水浴處理10分鐘。期間振蕩幾次。
3、3000g離心3分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中，加入550μl 緩沖液R4混勻。
4、冰上放置5分鐘。8000g離心10分鐘。轉(zhuǎn)移上清到新的離心管中。
5、以下按標(biāo)準(zhǔn)操作步驟的第五步繼續(xù)操作。

DNA濃度及純度檢測：
基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。提取的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。可配制0.8-1.0％瓊脂糖凝膠，使用λ/HindIII判斷基因組的大小，完整的基因組大小應(yīng)在23kb以上。使用分光光度計(jì)檢測時(shí)， OD260/OD280比值應(yīng)為1.7–1.9之間，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水洗脫，比值可能偏低，但并不表明DNA純度不高。

常見問題分析：

常見問題	可能原因	建議
沒有洗脫出DNA	加入緩沖液R5后沒有加入無水乙醇	樣品過柱前，必須用無水乙醇調(diào)整核酸結(jié)合條件，否則核酸不能掛柱。
	漂洗緩沖液WB2中沒有加入乙醇	漂洗緩沖液WB2使用前請(qǐng)按照標(biāo)簽加入無水乙醇。無水乙醇加入量不正確會(huì)導(dǎo)致核酸提取量大大降低。
低濃度的DNA量	緩沖液R2使用過量	按照步驟1加入適量緩沖液R2
	洗脫體積太小	洗脫體積不能低于50μl，如洗脫體積太小，回收率將大大降低。
	洗滌不恰當(dāng)	漂洗緩沖液WB2使用前請(qǐng)按照標(biāo)簽加入無水乙醇。無水乙醇加入量不正確會(huì)導(dǎo)致核酸提取量大大降低。
低A260/A280比率	蛋白污染	不要忽略步驟8中用漂洗緩沖液WB1沖洗吸附柱
	洗脫液pH值不合適	確保使用的洗脫液pH在8.0以上，如低于8.0將導(dǎo)致DNA洗脫量過低。
下游應(yīng)用不好	提取的DNA含鹽量高	漂洗緩沖液WB2使用前請(qǐng)按照標(biāo)簽加入無水乙醇。
	提取的DNA含有乙醇	步驟11空甩柱子2分鐘非常關(guān)鍵，徹底去除漂洗液中的乙醇。
	抑制PCR反應(yīng)	增加緩沖液R2用量，徹底去除腐殖酸等PCR抑制因子；步驟4中確保不要吸取到沉淀。

儲(chǔ)存條件：室溫，有效期12個(gè)月。

根據(jù)您的關(guān)注的土壤基因組DNA提取試劑盒，土壤基因組DNA提取試劑盒，RFT036，百奧萊博，，，您可能還對(duì)以下產(chǎn)品有需求：


BTN70302 一步離心式石蠟清除劑 100次
BTN111008 非酶多糖清除劑(DNA專用) 50次
WE0185 血塊基因組DNA提取試劑盒 50次
ALH166 土壤基因組DNA快速提取試劑盒 50次
RFT028 高純度質(zhì)粒提取試劑盒 100次|200次
QN0895 細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒 50T|100T
MT0043 血液基因組DNA提取試劑盒(15分鐘) 50T
WH0215 拭子基因組DNA提取試劑盒（離心吸附柱法) 50次|200次

關(guān)注土壤基因組DNA提取試劑盒，土壤基因組DNA提取試劑盒，RFT036，百奧萊博，，的同時(shí)，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：

貨號(hào)	名稱	規(guī)格
BTN130979	柱式血清血漿DNA提取試劑盒	50次
WE0179	口腔拭子基因組DNA提取試劑盒	50次|200次
WE0204	磁珠法游離DNA提取試劑盒	96次
WE0396	游離DNA樣本保存管(5ml)	5ml×5支|5ml×50支
ALH107	凝血DNA提取試劑盒	320次×50μl
ALH136	細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒	50次|100次|200次
ALH151	大量植物樣本DNA提取試劑盒	10次

如果您覺得“RFT036 土壤基因組DNA提取試劑盒”描述資料不夠齊全，請(qǐng)聯(lián)系我們獲取詳細(xì)資料。(聯(lián)系時(shí)請(qǐng)告訴我從給覽網(wǎng)看到的，我們將給您最大優(yōu)惠！)
本頁鏈接：http://jssdj.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8523809.html
已經(jīng)有966位訪客查看了本頁.