血液細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA共是高品質(zhì)的DNA提取純化產(chǎn)品，由北京百奧萊博供應(yīng)，本產(chǎn)品用于生化實(shí)驗(yàn)研究等領(lǐng)域，血液細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA共是我司眾多優(yōu)質(zhì)DNA提取純化之一，質(zhì)量堪比同類(lèi)進(jìn)口產(chǎn)品，價(jià)格非常優(yōu)惠，目前正熱烈促銷(xiāo)中，恭候您的咨詢(xún)訂購(gòu)。...

特別提示：包括血液細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA共提試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱(chēng)：血液細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA共提試劑盒
英文名稱(chēng)：Blood nuclear DNA and mitochondrial DNA extraction kit
產(chǎn)品貨號(hào)：BTN120810
產(chǎn)品規(guī)格：25次

本試劑盒是在本公司血液DNA提取試劑盒產(chǎn)品基礎(chǔ)上開(kāi)發(fā)的、專(zhuān)門(mén)用于從新鮮或冷凍的哺乳動(dòng)物抗凝全血中同時(shí)提取細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA的試劑。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.一份樣品可以同時(shí)得到細(xì)胞核DNA和線(xiàn)粒體DNA，節(jié)約寶貴的實(shí)驗(yàn)材料。
2. DNA產(chǎn)率高。細(xì)胞核DNA產(chǎn)率一般為30-50μg/mL 新鮮血液，線(xiàn)粒體DNA產(chǎn)率約為1μg/mL 新鮮血液。陳舊血液DNA產(chǎn)率差別較大。
3. DNA 純凈，OD260/OD280在1.8-2.0 之間，可直接用于PCR、酶切、雜交等實(shí)驗(yàn)。
4.適用于哺乳動(dòng)物血液，不適用于其他動(dòng)物血液。
5. 所用試劑安全，健康環(huán)保。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
紅細(xì)胞裂解液D型	250mL
溶液A	25ml
溶液B	2ml
溶液C	5ml
DNA 洗脫液2.0	10ml
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸和保存，保存期限一年。

使用方法：

一：白細(xì)胞核和線(xiàn)粒體的分離
1. 將3mL 用EDTA 抗凝管收集的新鮮血液轉(zhuǎn)移到一個(gè)干凈的15mL塑料離心管中。注意：zuì好使用新鮮血液。對(duì)于陳舊血液，由于凍凝過(guò)程中冰晶已經(jīng)對(duì)細(xì)胞核膜和線(xiàn)粒體膜產(chǎn)生損傷，所以DNA 得率會(huì)大大減少，具體減少多少根據(jù)凍凝時(shí)間長(zhǎng)短不同而不同。
2. 向血液中加入等體積(3mL)的D型紅細(xì)胞裂解液；輕柔顛倒數(shù)次混勻，室溫靜置10分鐘以裂解紅細(xì)胞和白細(xì)胞的細(xì)胞膜，直至溶液變成清澈的紅色。注意：D型紅細(xì)胞裂解液一旦打開(kāi)后，非常容易污染細(xì)菌，未用完的部分zuì好-20℃保存，下次使用前，要溶解后充分搖勻。
3.室溫下1000 g離心10分鐘沉淀白細(xì)胞核。
4.轉(zhuǎn)移上清(含線(xiàn)粒體)到新的15mL塑料離心管中，注意不要觸及白細(xì)胞核沉淀。
5.在白細(xì)胞核沉淀中加入3mL D型紅細(xì)胞裂解液。輕柔顛倒數(shù)次混勻后，室溫下1000 g離心10分鐘以沉淀白細(xì)胞核。
6.轉(zhuǎn)移上清(含線(xiàn)粒體)到第4 步所得的、已經(jīng)含有上清的15mL塑料離心管中。
將白細(xì)胞核沉淀放置冰上，和即將準(zhǔn)備好的線(xiàn)粒體一起用于DNA提取，也可以放置在-20℃待用。
7. 將匯集的含線(xiàn)粒體的上清于4℃下15000g離心30分鐘。
8.小心移棄上清，小心將線(xiàn)粒體沉淀重懸在1mL D型紅細(xì)胞裂解液中，然后轉(zhuǎn)移到1.5mL塑料離心管中，15000g離心5分鐘，移棄上清得到線(xiàn)粒體沉淀。
9. 用1mL D型紅細(xì)胞裂解液洗滌線(xiàn)粒體2次(每次先重懸線(xiàn)粒體，再15000g離心5分鐘得沉淀)。
10. 所得線(xiàn)粒體可以直接用于DNA提取，也可放置在-20℃待用。

二：DNA的提取(下面步驟為白細(xì)胞核DNA提取和線(xiàn)粒體DNA提取通用)
11.在白細(xì)胞沉淀或線(xiàn)粒體沉淀中加入0.5mL溶液A，用移液槍吹打數(shù)次混勻后再加入75μL溶液B，混勻后于55℃溫育10分鐘。注意：溶液將成渾濁狀。
12. 再加入0.2mL溶液C充分顛倒混勻。
13.在4℃下13000g離心20分鐘后，將上清(含DNA)轉(zhuǎn)入一新的1.5mL塑料離心管中。
14. 加入兩倍體積的自備無(wú)水乙醇充分震蕩混勻后，室溫13000 g離心5分鐘，去盡上清。
15. 加入1mL 75%乙醇，充分混勻后室溫13000g離心5分鐘，去盡上清。
16. 重復(fù)上步一次。
17. 短暫離心，去盡殘留溶液(此步十分重要，不要省略)。
18. 短暫晾干半分鐘，加入適量DNA 洗脫液2.0 溶解DNA(對(duì)細(xì)胞核DNA，可加入500μL DNA 洗脫液2.0，對(duì)線(xiàn)粒體DNA，可加入50μL DNA 洗脫液2.0)。
19. 65℃保溫15分鐘以便徹底溶解DNA沉淀。溶解后的DNA可以立即用于后續(xù)的OD 檢測(cè)、酶切、PCR或其他實(shí)驗(yàn)，也可以放置在-20℃長(zhǎng)期保存。

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名稱(chēng)：柱式凝固血液DNA提取試劑盒
貨號(hào)：BTN71204
規(guī)格：50次
本試劑盒是凝固血液DNA提取試劑盒(BTN71002)的升級(jí)產(chǎn)品，專(zhuān)門(mén)用于從新鮮或凍存的凝固全血(包括人和禽類(lèi))中提取基因組DNA。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
1. DNA更加純凈，OD260/280在1.8-2.0之間，可直接用于PCR、酶切、雜交等。
2. 操作更加簡(jiǎn)單快捷，比凝固血液DNA提取試劑盒快十分鐘以上。
3. 每克新鮮凝固全血DNA產(chǎn)量為20-50μg DNA。
4. 安全，本試劑盒對(duì)人體，無(wú)腐蝕性和刺激性氣味。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
溶液A	50ml
溶液B	50ml
溶液C	50ml
離心吸附柱	50套
通用洗柱液	50ml
DNA洗脫液	10ml
說(shuō)明書(shū)	1份

儲(chǔ)存條件：常溫運(yùn)輸，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
1. 65℃預(yù)熱溶液A，待其沉淀溶化后，充分混勻，取1mL到10mL或15mL塑料離心管中并將離心管放置于65℃待用。
2. 稱(chēng)取凝固血液0.1-0.5 g，加入到預(yù)熱的溶液A中短暫勻漿。勻漿過(guò)程中將產(chǎn)生大量泡沫，屬于正?，F(xiàn)象。
 注意：如果是干的血塊，用量不要超過(guò)0.2g，但需將干血塊剪成微小的碎片。
3. 將勻漿液置于65℃水浴保溫5分鐘，然后將不超過(guò)0.75mL的勻漿液上清轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中。
 注意：盡量不要轉(zhuǎn)移凝固血液碎片。
4.在上清液中加入等體積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻后冰浴5分鐘。
5. 12000～15000g室溫離心3分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中。
 注意：如果上清液呈紅色，屬于正常現(xiàn)象。
6. 加入0.2mL的自備氯f(wàn)ǎng，震蕩器上充分振蕩30秒混勻。
7. 12000～15000g室溫離心3分鐘，兩相交界面將有白色膜狀物。將不超過(guò)0.6mL的上清液小心轉(zhuǎn)移到新的1.5mL離心管中。
8. 加入1.5倍體積的溶液C，上下顛倒30秒混勻后分兩次轉(zhuǎn)移到離心吸附柱中，每次轉(zhuǎn)移后需要12000～15000g離心半分鐘并棄穿透液。
9.在離心吸附柱中加入0.7mL的通用洗柱液，12000～15000g離心半分鐘。
10.在離心吸附柱中加入0.3mL的通用洗柱液，12000～15000g離心半分鐘(此步為第二次洗滌，一般可以省略)。
11. 12000～15000g離心半分鐘以去除殘留通用洗柱液。注意：此步不能省略，否則殘留的通用洗柱液會(huì)影響DNA的后續(xù)反應(yīng)。
12. 將離心吸附柱轉(zhuǎn)移到一新的離心管中，加入100μL 通用洗脫液，12000～15000g離心半分鐘，管底溶液即DNA溶液，可立即使用或放冰箱長(zhǎng)期保存。

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